Evaluación de la conservación de una formulación de actinobacterias con aplicación en biorremediación de plaguicidas

Abstract

En Argentina, el uso intensivo de herbicidas responde a las exigencias de una economía primaria basada en cultivos de oleaginosas y cereales. La biorremediación mediante formulaciones de actinobacterias inmovilizadas en soportes sólidos representa una alternativa eficaz para mitigar la contaminación derivada del manejo inadecuado de estos compuestos. No obstante, para la aplicación efectiva de las formulaciones, es fundamental que al menos entre el 70 y 80% de las células microbianas sobrevivan, manteniéndose puras, genéticamente estables y conservando sus propiedades degradativas durante un periodo de almacenamiento. El OBJETIVO del trabajo fue evaluar la capacidad de una formulación a base de Streptomyces sp. M7 y vermiculita para conservar su viabilidad, pureza y actividad enzimática y degradativa a diferentes temperaturas. Para ello, Streptomyces sp. M7 se cultivó en medio TSB con vermiculita y se incubó durante 72 h a 30 °C y 150 rpm. La formulación obtenida se almacenó en oscuridad a 4 °C y a temperatura ambiente durante 28 días, y se tomaron muestras semanales para evaluar la viabilidad celular y la actividad de hidrólisis de diacetato de fluoresceína (FDA). Finalizado el periodo de almacenamiento, se analizó la capacidad del formulado para remover atrazina en medio mínimo suplementado con glucosa (1 g L-1) y atrazina (25 mg L-1) como fuentes de carbono y nitrógeno, respectivamente. Además, se evaluó su pureza mediante tinción de Gram y su estabilidad genética mediante detección cualitativa de enzimas extracelulares en placas de Petri. Los resultados demostraron que la viabilidad celular disminuyó en ambas temperaturas a lo largo de los 28 días de conservación. A 4 °C, aproximadamente el 60% de las células permaneció viable hasta el final del ensayo, mientras que, a temperatura ambiente, el 75% conservó su viabilidad durante los primeros 7 días sin variaciones significativas posteriores. La actividad de hidrólisis de FDA mostró una ligera tendencia decreciente en las células conservadas a temperatura ambiente, mientras que los valores para esta actividad se mantuvieron relativamente constantes en aquellas almacenadas a 4 °C. Las observaciones macroscópicas y microscópicas confirmaron que la formulación de la actinobacteria conservó su pureza tras 28 días de almacenamiento en ambas condiciones. En cuanto a la actividad remediadora, las células inmovilizadas y almacenadas presentaron un desempeño ligeramente inferior respecto a las células frescas, con valores del 23% y 19% de remoción de atrazina para las células conservadas a temperatura ambiente y a 4 °C, respectivamente. Sin embargo, el formulado microbiano almacenado a ambas temperaturas mantuvo su capacidad de producir enzimas extracelulares como celulasa, amilasa, gelatinasa, naringinasa, quitinasa y lipasa. En conclusión, se recomienda conservar la formulación de Streptomyces sp. M7 inmovilizada en vermiculita a temperatura ambiente, donde se mantuvieron niveles adecuados de viabilidad y actividad metabólica, preservando su pureza y capacidad de remover atrazina y producir enzimas de interés agroindustrial. Estos resultados respaldan su potencial aplicación para la biorremediación de suelos y efluentes contaminados con plaguicidas.