Progresión de la enfermedad y equilibrio hídrico en la poliquistosis renal autosómica dominante (PQRAD): el rol del contenido urinario de AMPc total y en vesículas extracelulares

Abstract

Introducción: Es de relevancia el papel del AMPc intracelular en el origen y la expansión de los quistes, está bien documentado y es el único objetivo terapéutico para mejorar la progresión de la PQRAD mediante el bloqueo del receptor V2 de la ADH. Dado que el AMPc intracelular renal no es una medición factible, el AMPc en orina se ha convertido en un marcador sustituto asequible. Nuestro grupo, también descubrió una acción adicional del AMPc, como carga de vesículas extracelulares (VEs) urinarias. Sin embargo, no se dispone de información sobre la osmorregulación y la evolución natural del AMPc-VE en la PQRAD. Este estudio tiene como objetivo determinar cómo participa el contenido de AMPc total y/o en VEs en la progresión de la enfermedad y el equilibrio hídrico.Métodos: Se estudiaron catorce pacientes con PQRAD, sin tratamiento previo con antagonismo del receptor V2. La progresión de la PQRAD se evaluó mediante la TFG estimada (TFGe), el volumen renal total ajustado en función de la altura (VRT/a), y el equilibrio hídrico mediante el aclaramiento osmolar y de agua libre. Se recogió orina fresca de la mañana para el aislamiento de VEs mediante un método de centrifugación adaptado y se determinó el AMPc en VEs y total mediante un ensayo de radioligando competitivo. La creatinina (Cr) en plasma y orina se cuantificó mediante el método colorimétrico de picrato alcalino. Las osmolalidades (Osm) plasmáticas y urinarias se midieron mediante el método de descenso crioscópico.Resultados: Los niveles totales de AMPc/Cr y AMPc/Osm en orina fueron de 1,71 ± 0,31 pmol/mg y 3,25 ± 0,61 pmol/mOsm, respe. AMPc/Cr total se correlacionó positivamente con AMPc/Osm (R=0,81, p < 0,002). AMPc/Cr, pero no AMPc/Osm, total se correlacionó significativamente con TFGe (R=0,65, p = 0,012) y su cambio anual (R=0,67, p = 0,008), e inversamente con VRT/a (R=0,57, p = 0,044). El aclaramiento osmolar se correlacionó inversamente con el AMPc/Cr total (R=-0,59; p=0,034) y mostró una tendencia con el AMPc/Osm (R=-0,52; p = 0,067). El AMPc-VEs, prorrateado tanto por Cr como por Osm, mostraron un patrón bimodal con VRT/a, aumentando hasta ≈1 L/m y cayendo a tamaños más grandesConclusiones:Nuestros resultados demuestran que el AMPc total en orina se correlaciona con el aclaramiento osmolar y los marcadores de progresión de la PQRAD, mientras que su entrega extracelular por las VEs refleja las alteraciones de la arquitectura del órgano. Esta evidencia propone que el estudio del AMPc como biomarcador de la progresión de la enfermedad y su relación con el estado de hidratación podría sugerir su utilidad como prueba potencial para la respuesta al tratamiento con tolvaptán

Background: The pivotal role of intracellular cAMP on cyst origin and expansion is well documented and is the unique therapeutic target to ameliorate the ADPKD progression through blockage of V2 receptor to ADH. Since renal intracellular cAMP is not a feasible measurement, urine cAMP has become an affordable surrogate marker. Our group also unraveled an additional cAMP location as a cargo of urinary extracellular vesicles (EVs). However, information about cAMP-EV on osmoregulation and natural evolution in ADPKD is unavailable. This study aims to determine how total- and/or EV-cAMP content participates in disease progression and water balance. Methods: Fourteen ADPKD patients, naïve to V2 receptor antagonism treatment were studied. ADPKD progression was evaluated by both estimated GFR (eGFR) and height-adjusted total kidney volume (htTKV), and water balance by osmolar and free water clearances. Fresh morning urine was collected for EV isolation by an adapted centrifugation method and determined EV- and total- (the sum of free available and EV content)- cAMP by competitive radioligand assay. Plasma and urine creatinine (Cr) were determined by the alkaline picrate colorimetric method. Plasma and urine osmolalities were measured by the freezing point decrease method. Results: Urine total cAMP/Cr and cAMP/Osm levels were 1.71 ± 0.31 pmol/mg and 3.25 ± 0.61 pmol/mOsm, respectively. Total cAMP/Cr positively correlated with cAMP/Osm (R=0.81, p < 0.002). Total cAMP/Cr, but not cAMP/Osm, significantly correlates with eGFR (R=0.65, p = 0.012) and its annual change (R=0.67, p = 0.008), and inversely correlated to htTKV (R= 0.57, p = 0.044). Osmolar clearance inversely correlates with total cAMP/Cr (R=-0.59;p=0.034) and tendency with total cAMP/Osm (R=-0.52; p = 0.067). The cAMP-EVs, prorated by both Cr and Osm, showed a bimodal pattern with htTKV, increasing to ≈1 L/m and falling at larger sizes.Conclusions: Our results demonstrate that urine total cAMP correlates with clearance osmolar and progression markers, whereas its extracellular delivery by EVs reflects the architectural disturbances of the organ. This evidence proposes the study of cAMP as a biomarker of disease progression. At the same time, its relationship with hydration status could suggest its utility as a potential test for the tolvaptan treatment response.