Eecto in vivo de nuevos adyuvantes en una vacuna génica experimental contra el alfaherpesvirus bovino 1 sobre la expresión génica de receptores tipo toll y citoquinas

Abstract

La vacuna génica codificando la glicoproteína D (gD) del alfaherpesvirus bovino 1 (BoAHV-1) ha surgido como una estrategia inmunitaria contra este patógeno, requiriendo de adyuvantes apropiados para inducir una respuesta protectora. En este trabajo se determinó la expresión génica de los receptores tipo toll (TLRs) endosomales y citoquinas inducidas por el uso de nuevos adyuvantes (Galectina 8 y/o MontanideTM GEL01 PR) en una vacuna génica contra BoAHV-1. Los bovinos fueron inmunizados (n: 4 animales/tratamiento) con 2 dosis de: A) plásmido vacío (pCINeo), B) plásmido vacunal (pCIgD); C) pCIgD + Galectina 8 (Gal8); D) pCIgD + Gel01 y, E) pCIgD + Gel01 + Gal8. A los 3 días postbooster, se aislaron leucocitos mononucleares mediante gradiente de Ficoll-Paque Plus 1.077g/ml y se determinaron los niveles de expresión de los TLR3, TLR7, TLR8 y TLR9 y citoquinas (IL-8, IL-10, IL-1β, IFN-γ e IL-12). El análisis de los datos se realizó mediante el software Relative Expression Software Tool (REST), empleando GAPDH como gen control. La mayor modulación de la respuesta inmune innata fue observada en bovinos inmunizados con la vacuna génica y ambos adyuvantes. Dicha formulación vacunal disminuyó la expresión del TLR3 (0,42 veces, p<0,05) e incrementó la expresión del TLR7 e IL12 (1,7 y 6,2 veces, respectivamente, p<0,05). Se observó también una regulación negativa para TLR3 (0,48 veces, p<0,05) en bovinos inmunizados con pCIgD + Gal8, mientras que el tratamiento con pCIgD + Gel01 aumentó la expresión de IL-12 (9,5 veces, p<0,05). No se detectaron diferencias significativas en la expresión de los demás receptores y citoquinas al momento de esta evaluación. Estos resultados muestran que la expresión de TLRs endosomales y algunas citoquinas puede ser modulada y regulada por la plataforma vacunal y tipo de adyuvante utilizado, permitiendo direccionar la respuesta inmune antígeno-específica hacia un perfil celular.