Estudio ultraestructural del proceso de infección de Ceramium rubrum en el alga roja Agarófita gracilaria chilensis

Abstract

Gracilaria es un alga roja marina de importancia económica a partir de la cual se extrae agar- agar, un galactano sulfatado ampliamente utilizado en la industria alimentaria, cosmetológica y farmacéutica (Smit, 2004). Es por esta razón que diversas especies se cultivan para la obtención de este bioproducto. Uno de los mayores problemas en los cultivos comerciales de Gracilaria es el epifitismo dado que la invasión de algas epífitas en las praderas implica una disminución en su productividad y en consecuencia grandes pérdidas económicas (Buschmann et al., 2008). Numerosos epífitos asociados a la especie Gracilaria chilensis pertenecen al orden Ceramiales (Leonardi et al., 2006). En el presente trabajo se estudió a nivel ultraestructural el proceso de infección de Ceramium rubrum en G. chilensis. Se empleó MEB para analizar los estadios iniciales de infección y MET para estudiar los cambios citológicos ocasionados en el huésped y en el epífito. Para MEB, fragmentos de talos infectados de G. chilensis se fijaron con glutaraldehído 3% preparado con buffer cacodilato de Na 0,1M (pH 7,4), conteniendo sacarosa 0,25M. Luego de la deshidratación y punto crítico, las muestras se metalizaron con oro paladio y se observaron en un microscopio JEOL SM-35 CF en el CCT-CONICET Bahía Blanca. Para MET, fragmentos de talos infectados se fijaron con glutaraldehído 3% + paraformaldehído 1,5% preparado con buffer cacodilato de Na 0,1M (pH 7,4), conteniendo sacarosa 0,25M. Luego se postfijaron con tetróxido de osmio 2%, se deshidrataron con acetona y se infiltraron con resina Spurr. Las secciones se tiñeron con acetato de uranilo y citrato de plomo y se observaron en un microscopio JEOL 100CX-II en el CCT-CONICET Bahía Blanca. Los rizoides de Ceramium rubrum perforaron la cutícula de Gracilaria chilensis (Fig. 1A, puntas de flecha) e ingresaron intercelularmente, alcanzando la médula del huésped (Fig. 1B). La corteza de G. chilensis adyacente al rizoide de Ceramium presentó hiperplasia y las células exhibieron el citoplasma desorganizado y comprimido (Fig. 1C, asteriscos). Durante el proceso de infección, los rizoides presentaron un complejo sistema de endomembranas, representado principalmente por abundante retículo endoplasmático (RE), dictiosomas, material electrónicamente denso rodeado por membranas del RE, membranas concéntricas y sacos vacuolares con material fibrilar (Fig. 1D-F). Durante la penetración de los rizoides se reconocieron dos formas de deposición de la pared celular: 1) caracterizada por el contacto directo de vesículas procedentes del RE con el plasmalema (Fig. 1E) y 2) representada por la contribución indirecta del RE a través de sacos vacuolares (Fig. 1F). De acuerdo con los resultados obtenidos se concluye que Ceramium rubrum representa uno de los epífitos más agresivos que desarrolla sobre Gracilaria chilensis.