Métodos
Descripción del sitio y muestreo El sitio de estudio (identificado como Pastizal serrano) está localizado en el piedemonte del sistema orográfico Tandilia, en las cercanías de la ciudad de Tandil, Argentina (37° 33,589’ S; 59° 7,824’ O; 180 m.s.n.m) y forma una pseudoestepa de mesófitas con matorral serrano. Se encuentra ubicada en la provincia fitogeográfica Pampeana, en el ecotono entre los distritos de la Pampa deprimida y de la Pampa austral. Sin embargo, el complejo serrano Tandilia conformaría un ecosistema de características propias, para el cual aún no se dispone de un mapa de vegetación (Oyarzabal et al., 2018). La región presenta un clima templado con una temperatura media anual de 13.7°C, un rango térmico que oscila entre los 6,7 y 21,1°C (datos del Servicio Meteorológico Nacional); y precipitación anual media de 889 mm (Priano et al., 2014). El suelo en los sitios de estudio es de tipo Hapludol lítico (Pereyra 2012), muy somero (profundidad típica de 15 cm, aunque el espesor del solum puede alcanzar los 20 cm), su pedogénesis se desarrolló a partir sedimentos loéssicos sobre roca, presenta una textura franco arenosa (0-10 cm; 15/18 % arcilla, 30/18 % limo y 56 / 64% arena; pastizal/forestación). Se encuentra en posición de loma, con pendientes 3 a 10 %, bien drenado, con escurrimiento rápido, permeabilidad moderadamente lenta, es no salino y no presenta alcalinidad. (Fuente: http://anterior.inta.gov.ar/suelos/cartas/series/Sierra_de_los_Padres.htm). Se realizaron muestreos sucesivos de suelo en dos parcelas vecinas diferenciadas por la cobertura vegetal. En una de ellas, en el año 2001 se instaló una plantación comercial de P. radiata (Fo, cobertura modificada; 17 años de edad al momento del inicio de este estudio), mientras que la otra estaba cubierta por diversas especies nativas y naturalizadas de herbáceas (Pa, Pastizal). El área bajo estudio tenía condiciones homogéneas ambientales (orientación, pendiente, profundidad de suelo) con una densidad promedio de 727 plantas/ha que alcanzaban los 4 m de altura en promedio. Esta cobertura permitió el desarrollo de una cobertura herbácea del 60-90%, dominada por Dactylis glomerata al momento de las mediciones (De Bernardi et al., 2021). El pastizal naturalizado (Pa, cobertura natural; 0,9ha en total) representa a la vegetación herbácea del sistema de piedemontecon D. glomerata como la dominante. Además, hay otras gramíneas y especies arrocetadas tales como Bromus catharticus, Paspalum spp., Leontodon taraxacoides y Cirsium vulgare. Este pastizal tiene especies nativas como Paspalum spp., quadrifarium, así como exóticas naturalizadas como D. glomerata. Las muestras se colectaron a 4 profundidades (00–05, 05–10, 10–15, 15–20 cm) con una frecuencia bimensual durante un año (junio 2018 a junio 2019), de al menos tres puntos al azar en cada cobertura vegetal. El suelo muestreado de cada fecha, profundidad y uso, se mezcló para obtener una muestra compuesta que representa la heterogeneidad del suelo en cada profundidad. Las muestras se almacenaron a 4 °C en oscuridad luego de la campaña hasta el momento de su análisis en laboratorio (Price et al., 2003). Variables de suelo El análisis de suelo se realizó inmediatamente después del muestreo en campo a partir de submuestras de las muestras compuestas. Como acondicionamiento previo, se tamizó el suelo con una malla de 2 mm. El contenido de agua gravimétrica del suelo (HS; %) en condiciones de campo se determinó mediante el pesaje de muestras de suelo fresco y seco en estufa. Para esto, las muestras se colocaron durante 24 h a 105 °C. La profundidadcidad de retención de agua (CRA; %) se obtuvo mediante sobresaturación de 100 g de suelo seco con agua destilada que luego se dejó drenar por gravedad hasta el final del goteo. Luego, las muestras se pesaron y se determinó HS y CRA mediante la Ec. 1, donde Dr es la masa de suelo húmeda o drenada y D es la masa de suelo seco (Burt, 2004). Por último, HS se expresó como una cantidad relativa a CRA0. HS o CRA0 = (Dr - D) 100 / D Ec. 1 El contenido de materia orgánica (MO; %) se determinó mediante el método de Schulte y Hopkins (Eyherabide et al., 2014), que consiste en la extracción de 5 gr de muestra integrada de cada estrato, previamente tamizada con malla de 500 μm que se colocará en estufa durante 24 h a 105 °C. Luego, se las deja enfriar hasta temperatura ambiente, se registra el peso y se coloca en mufla a 360 °C hasta estabilizar peso. Las muestras se enfrían en el desecador y se registra el peso final. El contenido de materia orgánica se calcula como se muestra en Ec. 2. MO = (D - C) 100 / DEc. 2 La determinación del pH se realizó de acuerdo a Burt (2004). Se pesaron 5 gr de muestra, previamente secada al aire y tamizada con malla de 2 mm, y se colocaron en un vaso de precipitados de 25 ml. Se agregaron 12,5 ml de agua descarbonatada a fin de obtener una suspensión cuya relación sea 1:2,5 (w:v; Deng et al., 2011; Burt, 2004). Luego, se agitó la mezcla unos 30 segundos y se la dejó reposar durante 40 min. Por último, se determinó el pH del líquido sobrenadante con un peachímetro de laboratorio, previamente calibrado en cada ocasión. Esta determinación, HS y MO se realizaron por triplicado para todas las muestras obtenidas en cada uno de los muestreos. Tasa de oxidación de CH4 en condiciones de laboratorio El suelo fresco de cada profundidad se homogeneizó por tamizado (2 mm) y se humedeció hasta alcanzar una humedad del 50 % de la profundidadcidad de retención de agua (CRA0; Serrano-Silva et al., 2014). Todas las profundidades se submuestrearon (200 g) y se colocaron por triplicado homogéneamente distribuidos en cámaras estáticas herméticas de 2,01 l con una válvula de una vía para el muestreo de la atmósfera interna de la cámara. Se incluyó un blanco para cada profundidad de suelo que consistió en una submuestra de suelo autoclavado (0,5 h a 122 °C). Las muestras se estabilizaron en oscuridad a 21 °C en contacto con el aire atmosférico durante la noche; luego, las cámaras se expusieron a condiciones ambientales por 30 minutos y se cerraron antes del inicio de la medición (Bárcena et al., 2014; Hiltbrunner et al., 2012). La TOM se estimó mediante el monitoreo del decaimiento de la concentración de CH4 en la atmósfera de cada cámara a lo largo de cinco intervalos regulares de tiempo: 0, 1, 2, 3 y 4 horas luego de la clausura de la cámara. Se empleó una interpolación exponencial de los datos. Las concentraciones de los gases se analizaron con un cromatógrafo gaseoso (Agilent 7890A; Estados Unidos de América), equipado con una columna G3591-81004 - 6Ft HayeSep Q 80/100 Ultimetal y un FID para determinar la concentración de CH4. La presión del gas transportador (N2) se mantuvo a 27 psi y el flujo de los gases de la llama (H2 y O2) se estableció en 40 y 450 ml min-1. Las temperaturas del horno y del detector FID fueron 60 °C y 300 °C, respectivamente.