Condicionamiento de la receptividad endometrial en pacientes con fallas recurrentes de implantación en fertilización in vitro

Abstract

Pregunta de estudio: ¿La receptividad endometrial en pacientes con fallas recurrentes de implantación (RIF) en tratamientos de fertilización in vitro está condicionada por alteraciones en el programa de decidualización? Lo que se sabe: La decidualización de las células estromales endometriales involucra un espectro de cambios de los cuales dependerá la receptividad endometrial. Respuesta resumida: Las pacientes con RIF presentan alteraciones en el programa de decidualización, en la respuesta inflamatoria asociada y en la adhesión del blastocisto. Diseño del estudio: cuasi experimental controlado. Materiales y Métodos: El análisis bioinformático integrado incluyó información de bases de datos públicas (Reactome, Gene Ontology, WikiPathways, KEGG, GEO) y el Software Gephi para el armado de las redes de genes asociados al proceso de decidualización. Como modelo in vitro de decidualización se usó la línea celular HESC (Human Endometrial Stromal Cells) y ex vivo, biopsias de endometrio de mujeres con RIF y fértiles. Los genes IFGBP1, Prolactina, NLPRP3 e ITGA8 fueron cuantificados por RT-qPCR; IL-1β por marcación intracitoplasmática y citometría de flujo. Resultados: El análisis in síllico de los procesos de decidualización, inflamación y regulación genética permitió identificar una red de genes que los conectan. En las células HESC decidualizadas se confirmó el aumento de la respuesta inflamatoria (activación del inflamasoma NLRP3 y de la producción de IL-1β activa). En otro análisis bioinformático se encontró la expresión diferencial de genes a partir de arrays de pacientes con RIF y de pacientes fértiles. La validación en biopsias de endometrio de pacientes con RIF, mostró una expresión disminuida significativamente de IFGBP1 y prolactina, NLRP3 e ITGA8 (integrina involucrada en la adhesión del blastocisto) comparado con la expresión de estos genes de pacientes fértiles. Limitaciones del estudio: Si bien los resultados fueron validados en muestras de endometrio se necesitan más estudios para dilucidar si estos mecanismos operan de manera similar in vivo. Implicancias de los hallazgos: El entendimiento de alteraciones en el programa de decidualización aportaría a esclarecer la “memoria del endometrio”, un campo muy poco explorado aún.

Study question: Is the endometrial receptivity in patients with recurrent implantation failures (RIF) conditioned by an alteration in the decidual program? What is known: Decidualization of endometrial stromal cells involves a spectrum of changes from which endometrial receptivity arose. Summary answer: Patients with RIF present alterations: in the decidualization program, in the associated inflammatory response and in the adhesion of the blastocyst. Study design: exploratory, prospective case-control type. Materials and Methods: The integrated bioinformatic analysis included information from public databases (Reactome, Gene Ontology, WikiPathways, KEGG, GEO) and used Gephi Software for the assembly of the networks. The HESC (Human endometrial stromal cells) cell line was used as an in vitro model of decidualization, and ex vivo endometrial biopsies from women with RIF and fertile. The IFGBP1, Prolactin, NLPRP3 and ITGA8 genes were quantified by RT-qPCR; IL-1β by intracytoplasmic labeling and flow cytometry. Results: The in-silico analysis of the processes of decidualization, inflammation and genetic regulation allowed us to identify a network of genes that connect them. In decidualized HESC cells, we confirmed the increase in the inflammatory response (activation of the NLRP3 inflammasome and the production of active IL-1β). In another bioinformatic analysis we studied the differential expression of genes from arrays of patients with RIF. Validation in endometrial biopsies from patients with RIF showed significantly decreased expression of IFGBP1 and prolactin, NLRP3 and ITGA8 (integrin involved in blastocyst adhesion). Study limitations: Although the results were validated in endometrial samples, further studies are needed to elucidate whether these mechanisms operate similarly in vivo. Implications of the findings: The understanding of alterations in the decidualization program would contribute to clarify the “memory of the endometrium”, a field that has not yet been explored.