Expresión genética y actividad metabólica del citocromo P4503A a nivel hepático en ovinos: Efecto de la dexametasona como agente inductor

Abstract

Las enzimas del sistema citocromo P450 (CYP) se expresan en forma constitutiva en mamíferos, pero existen numerosos factores que pueden modular sus niveles de expresión y/o sus actividades metabólicas. La dexametasona (DEX) es comúnmente utilizada para estudiar diferentes mecanismos de expresión de genes que codifican enzimas involucradas en el metabolismo de xenobióticos. El objetivo del presente trabajo fue estudiar el efecto de la administración repetida de DEX (7 días a razón de 3 mg/kg/día) sobre la expresión y la actividad metabólica de la subfamilia CYP3A en el hígado de ovinos, como así también la expresión de los factores de transcripción presumiblemente involucrados en la regulación de la expresión de esta subfamilia. La expresión genética de la isoenzima CYP3A28-like y de los factores de transcripción (GR, CAR, PXR y RXRα) se estudió a través de la cuantificación de los mensajeros específicos mediante Real Time PCR. La cuantificación de la proteína se realizó mediante inmunobloting y las actividades metabólicas microsomales CYP3A-dependientes se analizaron utilizando sustratos específicos. El tratamiento crónico con DEX incrementó (p<0.01) las actividades metabólicas CYP3A-dependientes (triacetiloleandomicina N-desmetilasa = 310 % y eritromicina N-desmetilasa = 195 %). Esto se correlacionó con un incremento en los niveles de expresión del ARNm específico (267 %, p<0.01) y en el contenido de proteína (34 %, p<0.05). El tratamiento con DEX duplicó, en los animales tratados con DEX, los niveles de expresión del factor de transcripción RXRα (p<0.001). Se concluye que la DEX es un agente inductor de la subfamilia CYP3A en ovinos. Los mecanismos moleculares responsables de esta modulación continúan bajo estudio en nuestro laboratorio.