Efecto extraóseo del bisfosfonato alendronato sobre el tejido adiposo en obesidad e hipoestrogenismo

Abstract

La obesidad es una enfermedad crónica y progresiva en la cual la expansión del tejido adiposo juega un rol determinante, generando estrés oxidativo y un perfil inflamatorio. El estrés oxidativo involucra un aumento en la generación de especies reactivas de oxígeno, productos del metabolismo celular normal que, si bien en concentraciones fisiológicas exhiben acciones beneficiosas en sistemas de señalización celular, una sobreproducción de las mismas tiene consecuencias nocivas para las células, como daño en el ADN, envejecimiento celular y acción cancerígena. A su vez, el aumento de la masa de tejido adiposo, genera un desequilibrio en la producción de adipoquinas proinflamatorias que conduce en última instancia a la desregulación de procesos metabólicos en diversidad de tejidos. Los bisfosfonatos fármacos de uso habitual para el tratamiento de enfermedades asociadas a la pérdida de masa ósea, como la osteoporosis postmenopáusica. Si bien la acción primaria de los bisfosfonatos es a nivel óseo, también se han reportado efectos en otros tejidos. Sabiendo que el sobrepeso y la obesidad representan condiciones asociadas a la menopausia, en este trabajo investigamos el impacto del bisfosfonato alendronato (ALN) sobre el tejido adiposo en un modelo de obesidad e hipoestrogenismo. Para ello se utilizaron ratas Wistar ovariectomizadas bilateralmente (OVX) y alimentadas con una dieta de alto contenido en grasas (27%). Se aisló el tejido adiposo retroperitoneal (40-60 mg) y se trató in vitro durante 18 horas con ALN 5 μM, mientras que el grupo control recibió solamente tratamiento con vehículo (buffer PBS, pH 7.2-7.4). Finalizado el tiempo de tratamiento, se tomaron alícuotas del medio de cultivo y se midieron los niveles de peróxido de hidrógeno (H2O2) por fluorimetría y los niveles de leptina empleando un kit de ELISA (R&D Systems, Inc.). La producción de sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS) se midió luego de homogeneizar el tejido utilizando un método colorimétrico. Los resultados obtenidos demostraron que la incubación del tejido adiposo con ALN indujo una reducción significativa en los niveles de H2O2 con respecto al control (2729 ± 427 vs 1639 ± 92 nmol H2O2/mg de tejido, control vs ALN respectivamente, P<0.002). Se observó además que el tratamiento con el bisfosfonato inhibió significativamente la producción de TBARS (2468 ± 268 vs 2182 ± 426 nmol MDA/g de tejido, control vs ALN respectivamente, P<0.0001). Los efectos antioxidantes de ALN también se observaron en tejido adiposo proveniente de ratas OVX alimentadas con una dieta normal (4% grasa), tanto en los niveles de H2O2 (41% de inhibición con respecto al grupo control, p<0.0005) como de TBARS (53% de inhibición con respecto al grupo control, p<0.0001). Al estudiar el efecto de ALN sobre la síntesis de leptina, se demostró que el bisfosfonato redujo notoriamente la producción de la adipoquina en comparación con el grupo control (11.1 ± 1.57 vs 7.79 ± 1.18 pg/mg de tejido, control vs ALN respectivamente, P<0.0025). Cabe remarcar que los niveles séricos de leptina en ratas OVX obesas fueron marcadamente superior que aquellos detectados en ratas OVX normopeso (122% sobre el control, p<0.001). Los resultados presentados evidencian una nueva acción extraósea del ALN a través de un efecto directo sobre el tejido adiposo reduciendo el estrés oxidativo y la producción de leptina.