Primer aislamiento de Leptospira borgpetersenii a partir de esmegma prepucial de bovinos en Argentina

Abstract

La leptospirosis bovina es una enfermedad infecciosa causada por una bacteria del género Leptospira que puede transmitirse por contacto con orina, secreciones (uterinas, leche) o suelo y agua contaminados. Se ha reportado la presencia de material genético de leptospiras en semen y fluido vaginal que sugieren la posible transmisión venérea pero no ha sido demostrada plenamente en ganado bovino. Aún cuando la enfermedad tiene impacto sobre parámetros reproductivos, pocos estudios ponen foco en la detección de leptospira en el tracto genital. El objetivo del presente trabajo es reportar el aislamiento de Leptospira sp. patógena en el tracto reproductivo de toros a partir de muestras de esmegma prepucial. Se estudiaron 9 toros de un establecimiento ganadero de la provincia de Buenos Aires, Argentina (36°48' S 59°51' O) con confirmación de leptospirosis por serología, presentación de abortos y porcentajes de parición del 77% en vacas y del 40% en vaquillonas. Las muestras de esmegma se colectaron por método de aspiración con pipetas de inseminación artificial, se transportaron en 5 ml de PBS hasta el laboratorio y se alicuotaron para: observación directa por microscopia de campo oscuro, aislamiento por cultivo y detección de ADN de Leptospira sp. patógenas por amplificación en tiempo real de fragmentos de 285pb y 423 pb de los genes SecY y lipL32 respectivamente. Para el cultivo, se sembraron 0,5 ml del material en medio EMJH líquido y semisólido, previa descontaminación con 0.2 µg/ml del antimicrobiano 5 Fluoracilo overnight y filtración con membrana de 0.45 µm. La genotipificación se realizó por MLVA (multiple-locus variablenumber tándem repeats análisis) y secuenciacion del gen rrs. Se detectó la presencia de ADN de Leptospira sp. patógena en seis muestras y se observó desarrollo en el cultivo de una de éstas. El microorganismo aislado fue tipificado como Leptospira borgpetersenii. La detección y aislamiento del agente patógeno en esmegma prepucial refuerza la hipótesis de la trasmisión venérea y sugiere considerar la inclusión de los machos en el diagnóstico de la enfermedad durante los programas de sanidad para otras enfermedades reproductivas.