Insulina induce cambios a nivel transcripcional y post-traduccional en la expresión de receptores GABAA en células Jurkat

Abstract

Hemos demostrado la presencia de receptores de GABAA en la línea celular de linfocitos T, Jurkat. Al igual que lo descripto en neuronas, observamos variación en la expresión de subunidades frente a diferentes estímulos, tales como GABA y progesterona. Dado que en neuronas insulina induce cambios en la expresión de receptores GABAA, evaluamos si este fenómeno también ocurre en linfocitos. Para ello, células Jurkat fueron expuestas a insulina 0,5 µM durante 15 y 40 h y evaluamos mediante RT-qPCR cambios en la expresión del ARNm de subunidades del receptor. Luego de 15 h de incubación con insulina, se detectó aumento de la subunidad β3 y disminución de la subunidad α1. Por otro lado, se evaluó si insulina induce cambios rápidos en la expresión de receptores en membrana. Se expuso a células Jurkat durante 10 minutos a insulina y luego se realizó una tinción por immunofluorescencia de los receptores de superficie utilizando un anticuerpo contra la subunidad β3. Se observó un incremento en membrana de la marca específica para dicha subunidad luego de la incubación con la hormona. Durante este tiempo, los niveles de ARNm de dicha subunidad no fueron alterados, sugiriendo que insulina induce en células Jurkat, al igual que en neuronas, una rápida translocación a membrana de los receptores GABAA sin afectar la transcripción de genes. Nuestros resultados demuestran dos efectos temporalmente separados de insulina en la expresión de receptores de GABAA en células Jurkat: uno lento, que consiste en la modificación de la expresión de subunidades a nivel de ARNm; otro rápido, post-traduccional, en el que la subunidad β3 sería fosforilada aumentando la translocación de receptores a membrana.