Efectos del envejecimiento en el metabolismo de 2-araquidonoilglicerol en fracciones de membrana y soluble de corteza cerebral de rata

Abstract

El 2-araquidonoilglicerol (2-AG), componente importante del sistema cannabinoide, es sintetizado en terminales postsinápticas por las enzimas diacilglicérido lipasa (DAGL) y lisofosfatidato fosfohidrolasa (LPAasa). En su degradación participan la monoacilglicérido lipasa (MAGL), la ácido graso amido hidrolasa (FAAH) y la serina hidrolasa ABHD6. El objetivo del trabajo fue evaluar la contribución de las distintas vías de síntesis y degradación de 2-AG y como ésta se veía modificada por el envejecimiento. Se emplearon fracciones de membrana y soluble de corteza cerebral (CC) de ratas adultas (4 meses) y seniles (28 meses), las cuales fueron obtenidas por centrifugación diferencial. Para la determinación de las actividades de DAGL, MAGL y LPAasa se emplearon sustratos radiomarcados con tritio de diferente composición en acilos. Los productos monoacil[3H]glicerol y [3H]glicerol fueron cuantificados previa separación por CCF o a partir de la fase acuosa, respectivamente. Se observó que la vía de síntesis más activa es la de la LPAasa siendo mayor en la fracción de membrana; la que se ve disminuida en el envejecimiento. Empleando como sustrato DAG rico en ácido graso 20:4, pudo observarse una mayor asociación de la DAGL a la membrana por efecto del envejecimiento. La degradación de 2-AG en membrana es similar a la del soluble y no se ve modificada por el envejecimiento. La utilización de URB-602 (inhibidor de la MAGL) y de URB-597 (inhibidor de la FAAH) nos permitió evidenciar que la degradación de 2-AG en membranas adultas es llevada a cabo por la ABHD6 y por la MAGL, siendo la primera la única responsable en la degradación del cannabinoide en seniles. Nuestros resultados demuestran una regulación precisa del metabolismo de 2-AG, la cual se ve modificada en el envejecimiento fisiológico.