Lectinhistochemical staining of granuloma induced by bacillus Calmette-Guerin in Piaractus mesopotamicus

Abstract

Objective: This study was conducted to evaluate, by means of lectinhistochemistry (LHC), the expression of carbohydrates in granulomas induced by the bacillus Calmette-Guerin (BCG) in muscle tissue of Piaractus mesopotamicus after 33 days. Material and methods: Histological sections with 3 µm thick were incubated with the following lectins: WGA (Wheat germ agglutinin), DBA (Dolichos biflorus agglutinin) and HPA (Helix pomatia agglutinin), and the results were evaluated by light microscopy. Results: Acid fast bacilli were stained by Ziehl Neelsen (ZN) and strong labeled by WGA in the cytoplasm of macrophages. Labeling with DBA was intense in fibroblasts and weak in macrophages. On the other hand, HPA binding was stronger in macrophages, especially in those that were in close contact with epithelioid cells, without evidence of binding to fibroblasts. The epithelioid cells were not labeled by the used lectins, but they were identified by Hematoxilin-Eosin (HE). The lectins labeled specific type saccharides in glycoproteins, as N-acetylglucosamine present in bacilli and macrophages, as well as N-acetyl-galactosamine in macrophages. The control group showed no inflammation or lectin binding. Conclusions. This technique may be useful in identifying receptors for WGA, DBA and the HPA lectins in epithelioid granuloma induced by BCG in P. mesopotamicus.

Objetivo: El presente estudio fue realizado para evaluar por medio de lectinhistoquímica (LHC), la expresión de carbohidratos en granulomas inducidos por el bacilo de Calmette-Guérin (BCG) en músculo de Piaractus mesopotamicus después de 33 días. Materiales y métodos: Cortes histológicos de 3 µm de grosor fueron incubados con las siguientes lectinas: WGA (Wheat germ aglutinin), DBA (Dolichos biflorus agglutin) y HPA (Helix pomatia agglutinin), y los resultados evaluados por medio de microscopia de luz. Resultados: Bacilos ácido resistentes fueron identificados por la tinción de Ziehl Neelsen(ZN). Se observó un marcaje intenso con WGA en el citoplasma de macrófagos. El marcaje con DBA fue intenso en fibroblastos y débil en macrófagos. Con la lectina HPA el marcaje fue intenso en macrófagos, principalmente en los que estaban en estrecho contacto con las células epitelióides, externamente se observó marcaje débil en fibroblastos. Las células epitelióides no fueron marcadas por las lectinas, pero fueron identificadas con la tinción de Hematoxilina-Eosina (HE). Las lectinas tuvieron un tipo de marcaje específico en algunos monosacáridos, como N-acetilglucosamina presente en los bacilos y en macrófagos, y N-acetilgalactosamina en macrófagos. En el grupo control no fue observada inflamación así como tampoco marcaje con las lectinas. Conclusiones. Esta técnica resultó eficiente en la identificación de receptores para las lectinas WGA, DBA y HPA en el granuloma epitelióide inducido por BCG en P. mesopotamicus.