Caracterización de bacteriófagos para el biocontrol de Escherichia coli productor de toxina Shiga: resistencia a diferentes temperaturas y pH

Abstract

Escherichia coli productora de toxina Shiga (STEC) es una bacteria de alto impacto en la saludpública. STEC causa diarrea, colitis hemorrágica y síndrome urémico hemolítico (SUH). El ganadobovino es uno de sus principales reservorios y al excretar STEC en sus heces, pueden contaminarseel ambiente, el cuero del animal o la carne durante la faena. Dado que no existe un tratamientoespecífico para el SUH, es fundamental el control de STEC en alimentos. Los bacteriófagos (fagos)y/o sus enzimas surgen como una alternativa prometedora para reducir patógenos transmitidos poralimentos. Los fagos candidatos para biocontrol deben ser evaluados frente a diferentes factores,para determinar su resistencia y las condiciones óptimas para su conservación o inactivacióncompleta. En este trabajo nos propusimos evaluar la viabilidad de fagos líticos para STEC, luego dedistintos tratamientos. Evaluamos cinco fagos (stocks de alto título) luego de una incubación de 60minutos a distintas temperaturas (4, 20, 40, 60 y 75°C) a pH 7 y diferentes condiciones de pH (2, 3, 4,7 y 10) a 25°C. Los experimentos se realizaron por duplicado y los títulos fágicos se determinaronmediante diluciones en ensayo de spot test. Observamos que, luego de las incubaciones a 4°, 20° y40°C el título fágico se mantuvo para la totalidad de los fagos. Sin embargo, luego del tratamiento a60°C cuatro fagos disminuyeron 1 log su título, mientras que luego de 75°C no pudieron detectarsefagos infectivos. La totalidad de los fagos conservó su título luego de los tratamientos a pH 4,7 y 10.Mientras que a pH 3 el título de dos fagos se redujo 1 log y no se pudo detectar fagos infectivos enotro caso, y a pH 2 no se detectaron fagos infectivos en ningún caso. Dado que componentes de losalimentos o del ambiente en que se encuentren pueden producir condiciones que disminuyan el títulode los fagos, fue importante determinar que varios de éstos resistieron temperaturas elevadas(60°C), acidez (pH 3) y/o alcalinidad (pH10). Además, observamos que temperaturas ≥75°C o pH ≤2serían condiciones para la inactivación de estos fagos.