Macroencapsulación de Limosilactobacillus reuteri DSPV002C como suplemento nutricional para cerdos: Viabilidad en almacenamiento y en condiciones gastrointestinales simuladas

Abstract

El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto protector de la encapsulación de Limosilactobacillus reuteri DSPV002C en macrocápsulas elaboradas con materiales industriales en el almacenamiento y en condiciones gastrointestinales, in vitro e in vivo. Para la producción de macrocápsulas, se evaluaron diferentes materiales de pared o matriz (gelatina y almidón pregelatinizado), diferentes proporciones de inóculo:matriz y diferentes crioprotectores (permeados de suero y maltodextrina). Las macrocápsulas fueron dispuestas en moldes de tamaño similar al del alimento peleteado para cerdos y se liofilizaron. Luego se estudió la viabilidad de las macrocápsulas en el tiempo almacenadas a distintas temperaturas (congelación, refrigeración y temperatura ambiente) y atmósferas (con vacío/sin vacío). Las macrocápsulas con gelatina al 10% (p/v) + almidón pregelatinizado al 5% (p/v) y permeado de suero (10% p/v), con una proporción inóculo:matriz 9:1 (GS7.5P9) y almacenadas a temperatura de congelación y al vacío, fueron las que mantuvieron la mayor viabilidad de L. reuteri DSPV002C (9,3 log UFC/cápsula hasta los 210 días). En condiciones gastrointestinales simuladas, el inóculo encapsulado mostró una pérdida de viabilidad menor (0,58 ± 0,09 log UFC/ml; 26,53%) respecto del cultivo libre (1,56 ± 0,16 log UFC/ml; 2,85%). Finalmente, mediante la administración de las cápsulas GS7.5P9 a cerdos, se comprobó la tolerancia de las bacterias encapsuladas al medio gastrointestinal, con recuentos de viables iguales o superiores a 3,72 log UFC/g de materia fecal durante todo el ensayo. En este estudio se obtuvo una macrocápsula probiótica portadora de alta densidad de L. reuteri DSPV002C, con una vida útil prolongada, una forma conveniente para ser incluida en el alimento de cerdos y una supervivencia adecuada de células viables en el sitio de acción.

The aim of this study was to evaluate the protective effect of the encapsulation of Limosilactobacillus reuteri DSPV002C in macrocapsules made from industrial materials during production, storage and under simulated gastrointestinal conditions in vitro and in vivo. The production of macrocapsules involved the evaluation of different wall materials (matrix), namely, gelatin and pregelatinized starch, different inoculums, matrix ratios, and diverse cryoprotectants (whey permeate and maltodextrin). The different macrocapsules were arranged in molds of similar size to pig pelleted food and lyophilized. Then, the viability of the macrocapsules was assessed over time during storage at different temperatures (freezing, refrigeration and room temperature) and atmospheres (vacuum and non-vaccum). The macrocapsules with 10% w/v gelatin + 5% w/v pregelatinized starch, permeated (10%, w/v), with a 9:1 inoculum:matrix ratio (GS7.5P9), stored under freezing conditions and vacuum, exhibited the highest viability of L. reuteri DSPV002C (9.3 log CFU/cap until 210 d). Under simulated gastrointestinal conditions, the encapsulated inoculum showed less viability loss (0.58 ± 0.09 log CFU/ml, 26.53%), compared to the free culture (1.56 ± 0.16 log CFU/ml, 2.85%). Finally, by administering GS7.5P9 to pigs, the tolerance of the bacteria to the gastrointestinal environment was verified, with viable counts equal to or greater than 3.72 log CFU/g of fecal matter throughout the trial. In this study, a high-density carrier probiotic macrocapsule of L. reuteri DSPV002C was obtained, which displayed a long shelf life, a suitable shape to be included in pig feed and an adequate survival of viable cells at the site of action.