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Artículo

Optimización del diagnóstico de Pestivirus bovinos mediante el desarrollo de una metodología económica para detectar ARN viral en muestras frescas y fijadas en papeles de filtro

Título: Improvement of bovine pestiviral diagnosis by the development of a cost-effective method for detecting viral RNA in fresh specimens and samples spotted in filter papers
Favaro, Paula Melisa; Molineri, Ana InésIcon ; Dus Santos, María JoséIcon ; Calvinho, Luis Fernando; Pecora, AndreaIcon
Fecha de publicación: 04/2023
Editorial: Asociación Argentina de Microbiología
Revista: Revista Argentina de Microbiología
ISSN: 0325-7541
e-ISSN: 1851-7617
Idioma: Español
Tipo de recurso: Artículo publicado
Clasificación temática:
Ciencias Veterinarias

Resumen

 
Los Pestivirus bovinos son los agentes causales de la diarrea viral bovina, una enfermedad que genera importantes pérdidas económicas en el ganado vacuno. El objetivo de este trabajo fue mejorar su diagnóstico mediante el desarrollo de una RT-qPCR para detectar los Pestivirus bovinos A, B y H y diseñar un protocolo de recolección, envío y conservación de ARN viral en papeles de filtro. La RT-qPCR desarrollada demostró alta sensibilidad en la detección de estos virus en diferentes matrices: stock viral, suero y semen. Respecto de la posibilidad de usar la técnica para testear pools de suero, fue posible identificar un suero positivo dentro de un pool compuesto por 30 sueros. Además de evaluar la qPCR en muestras frescas, se analizó el uso de papeles de filtro para sembrar muestras de bovinos. La metodología de toma de muestras en dos tipos de papeles de filtro usando gotas de sangre fue una alternativa útil para el diagnóstico y permitió conservar ARN viral por hasta 12 meses a temperaturas de refrigeración.
 
Bovine pestiviruses are the causative agents of bovine viral diarrhea, a disease that causes severe economic losses in cattle. The aim of this study was to improve their diagnosis by developing a RT-qPCR to detect bovine pestiviruses A, B and H; and to set up a protocol for collecting, shipping and preserving bovine pestiviral RNA on filter papers. The developed RT-qPCR showed high sensitivity in detecting these viruses in different matrices: viral stocks, semen and serum samples. With regard to the possibility of using the technique to test serum pools, it was possible to identify a positive serum sample within a pool containing 30 sera. In addition to evaluating the qPCR from fresh samples, the use of filter papers to sow bovine samples was analyzed. The sampling method on two different filter papers using bovine blood drops was a useful alternative for diagnostic purposes and allowed to preserve pestiviral RNA for up to 12 months under refrigeration.
 
Palabras clave: BOVINE PESTIVIRUSES , DIAGNOSIS , FILTER PAPERS , RT-QPCR
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info:eu-repo/semantics/openAccess Excepto donde se diga explícitamente, este item se publica bajo la siguiente descripción: Atribución-NoComercial-SinDerivadas 2.5 Argentina (CC BY-NC-ND 2.5 AR)
Identificadores
URI: http://hdl.handle.net/11336/225796
DOI: https://doi.org/10.1016/j.ram.2022.10.002
URL: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0325754122001043
Colecciones
Articulos (IDICAL)
Articulos de INSTITUTO DE INVESTIGACION DE LA CADENA LACTEA
Articulos (IVIT)
Articulos de INSTITUTO DE VIROLOGIA E INNOVACIONES TECNOLOGICAS
Citación
Favaro, Paula Melisa; Molineri, Ana Inés; Dus Santos, María José; Calvinho, Luis Fernando; Pecora, Andrea; Optimización del diagnóstico de Pestivirus bovinos mediante el desarrollo de una metodología económica para detectar ARN viral en muestras frescas y fijadas en papeles de filtro; Asociación Argentina de Microbiología; Revista Argentina de Microbiología; 55; 2; 4-2023; 167-175
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