La inmunización con OMP31 recombinante es inmunogénica y protege contra la infección por brucella canis en ratón

Abstract

La brucelosis afecta a los caninos ocasionando principalmente problemas reproductivos. El objetivo fue evaluar la inmunogenicidad y la protección conferida por la proteína recombinante Omp31 (rOmp31) y por el plásmido que codifica para esta proteína (pCIOmp31) contra B. canis en ratones Balb/c. Grupos de ratones (n=10) fueron inmunizados con A) rOmp31+adyuvante de Freund incompleto (AFI), rOmp31+hidróxido de aluminio (HA), C) rOmp31+Quil A, D) rOmp31+Montanide IMS 3012 VGPR, E) pCIOmp31 (100μg) F) pCIOmp31/rOmp31+AFI (Primeboost o PB) y G) B. canis M- inactivada+AFI (bacterina control). Se incluyó un grupo control no vacunado (SSE). Treinta días post-última inmunización (pi) los ratones fueron inoculados con 5,5×105 UFC de B. canis RM6/66 y se sacrificaron 30 días después con el fin de determinar la carga bacteriana esplénica. Las muestras de suero se analizaron en ELISA indirecto anti-Omp31 y en aglutinación rápida en placa (RSAT). La determinación de IFN gamma e IL-4 se realizó en sobrenadante de cultivo de esplenocitos estimulados con Omp31 mediante ELISA de captura. Los bazos fueron procesados para la determinación del número de UFC. Todas las estrategias, excepto pCIOmp31, indujeron una producción significativa de anticuerpos IgG específicos y de IFN gamma e IL-4 (P<0,01). Los sueros de los animales vacunados resultaron positivos a RSAT antes y después del desafío. La proteína rOmp31 en los distintos adyuvantes y la estrategia PB confirieron niveles de protección significativos (P<0,05). En conclusión, rOmp31 protege contra B. canis en el modelo ratón aunque la interferencia en el diagnóstico serológico convencional impediría su empleo como vacuna en caninos.