Clinfoproliferación en bovinos Holando Argentino reaccionantes a la prueba de tuberculina que transitan el periparto temprano

Abstract

Mycobacterium bovis desencadena en los bovinos infectados una respuesta immune celular persistente y evidenciable con la prueba de tuberculina. En el ganado esta respuesta se suprime durante el periparto temprano (PP) pero pocos trabajos estudiaron este fenómeno en bovinos tuberculinopositivos. El objetivo fue medir la linfoproliferación frente al derivado proteico purificado bovino (DPPb) en bovinos tuberculinopositivos y negativos que transitan y no transitan el PP. Para ello se utilizó una técnica que cuantificó la producción de sales de tetrazolium a partir del MTT y otra que cuantificó la producción de IFNγ (Bovigam®). A partir de sangre entera se obtuvieron leucocitos mononucleares periféricos (LMP) mediante centrifugación en gradiente (Histopaque 1077) de diez vacas Holando Argentino en PP, cinco tuberculinopositivas (DPPPP) y cinco tuberculinonegativas (PP), y nueve que no transitaban el PP, cinco tuberculinopositivas (DPP) y cuatro tuberculinonegativas (NoDPPNoPP). Se estimularon 100.000 LMP con 100 μL de RPMI suplementado que contenía 20 μg/mL de DPPb durante tres y seis días para los ensayos colorimétrico y de IFNγ, respectivamente. Los índices de estimulación con el MTT fueron para los grupos DPPPP y DPP del 96% y para los PP y NoDPPNoPP del 90% y 91%, respectivamente. Las DO del ELISA que cuantificó el IFNγ para los grupos DPPPP y DPP fueron de 0,46 y 0,86 y para los grupos PP y NoDPPNoPP de 0,1 y 0,09. Ambas técnicas detectaron una mayor linfoproliferación en bovinos tuberculino positivos pero la detección del IFNγ permitió la diferenciación cuantitativa entre los grupos DPPPP y DPP.