Análisis de las islas genómicas OI-71 y OI-122 en cepas de Escherichia coli verotoxigénico aisladas en Argentina

Abstract

Los alimentos contaminados, y particularmente los productos cárnicos en Argentina, son la principal vía de transmisión al hombre de Escherichia coli verotoxigénico (VTEC). Este grupo de patógenos emergentes puede causar enfermedades severas en los seres humanos, tales como colitis hemorrágica y síndrome urémico hemolítico. El sistema de secreción tipo III es un factor génico determinante de la colonización y persistencia de esta bacteria en los reservorios animales y de la virulencia en humanos. Los sustratos translocados de este sistema, denominados nle (efectores no codificados en LEE -locus de borrado del enterocito-), se encuentran codificados en islas de patogenicidad genómicas (PAIs). La presencia de estos genes nle puede ser usada para hacer una evaluación del riesgo molecular" (MRA) y predecir la virulencia potencial de las cepas. El objetivo, entonces, fue analizar la distribución de genes nle ubicados en dos PAIs, OI-71 y OI-122, en una selección de cepas VTEC nativas aisladas de alimentos cárnicos, bovinos y humanos. Se estudiaron 200 aislamientos VTEC pertenecientes al serotipo O157:H7 y a 48 serotipos no-O157:H7. Los aislamientos habían sido previamente analizados para la detección de genes que codifican factores de virulencia, vtx1 y vtx2, eae, ehxA, saa y subA. Los genes nleB, nleE y ent/espL2, de la OI-122, y los genes nleA, nleF y nleH1-2, que forman parte, entre otros, de la OI-71, se amplificaron por PCR. Los productos de la amplificación se visualizaron en geles de agarosa teñidos con SYBR Safe. Un total de 46 aislamientos resultó positivo para al menos uno de los genes nle: 32 (16 %) fueron positivos para nleA, 18 (9 %) para nleB, 43 (21,5 %) para nleE, 18 (9 %) para nleF, 23 (11,5 %) para nleH1-2, y 38 (19 %) para ent/espL2. Teniendo en cuenta los 6 genes detectados, se hallaron 15 perfiles diferentes. Todas las cepas LEE negativas, excepto dos, resultaron negativas para todos los genes nle. El patrón nleA-nleB-nleE-nleF-nleH1-2-ent/espL2 fue exclusivo de O157:H7 y, detectado tanto en cepas aisladas de humanos como de bovinos y de alimento. Este estudio permitió una primera evaluación del riesgo molecular de las cepas VTEC nativas en base a la ocurrencia de genes nle. Los resultados indican que estas VTEC son un grupo heterogéneo en relación a estos genes y que muchas de las aisladas de alimentos y bovinos son potencialmente riesgosas para la salud pública.