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dc.contributor.author
Balaban, Cecilia Lucía
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dc.contributor.author
Suárez, Cristian Alejandro
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dc.contributor.author
Boncompain, Carina Andrea
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dc.contributor.author
Peressutti Bacci, Natalia
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dc.contributor.author
Ceccarelli, Eduardo Augusto
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dc.contributor.author
Morbidoni, Héctor Ricardo
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dc.date.available
2023-10-30T11:46:57Z
dc.date.issued
2022-03
dc.identifier.citation
Balaban, Cecilia Lucía; Suárez, Cristian Alejandro; Boncompain, Carina Andrea; Peressutti Bacci, Natalia; Ceccarelli, Eduardo Augusto; et al.; Evaluation of factors influencing expression and extraction of recombinant bacteriophage endolysins in Escherichia coli; BioMed Central; Microbial Cell Factories; 21; 1; 3-2022; 1-19
dc.identifier.issn
1475-2859
dc.identifier.uri
http://hdl.handle.net/11336/216315
dc.description.abstract
Background: Endolysins are peptidoglycan hydrolases with promising use as environment-friendly antibacterials mainly when used topically. However, in general, endolysin expression is hampered by its low solubility. Thus, a critical point in endolysin industrial production is optimizing their expression, including improvement of solubility and recovery from cell extracts. Results: We report the expression of two endolysins encoded in the genome of phages infecting Staphylococcus aureus. Expression was optimized through changes in the concentration of the inducer and growth temperature during the expression. Usually, only 30–40% of the total endolysin was recovered in the soluble fraction. Co-expression of molecular chaperones (DnaK, GroEL) or N-term fusion tags endowed with increased solubility (DsbC, Trx, Sumo) failed to improve that yield substantially. Inclusion of osmolytes (NaCl, CaCl2, mannitol, glycine betaine, glycerol and trehalose) or tensioactives (Triton X-100, Tween 20, Nonidet P-40, CHAPS, N-lauroylsarcosine) in the cell disruption system (in the absence of any molecular chaperone) gave meager improvements excepted by N-lauroylsarcosine which increased recovery to 54% of the total endolysin content. Conclusion: This is the first attempt to systematically analyze methods for increasing yields of recombinant endolysins. We herein show that neither solubility tags nor molecular chaperones co-expression are effective to that end, while induction temperature, (His)6-tag location and lysis buffer additives (e.g.N-lauroylsarcosine), are sensible strategies to obtain higher levels of soluble S. aureus endolysins.
dc.format
application/pdf
dc.language.iso
eng
dc.publisher
BioMed Central
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dc.rights
info:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.uri
https://creativecommons.org/licenses/by/2.5/ar/
dc.subject
BACTERIOPHAGES
dc.subject
CHAPERONES
dc.subject
ENDOLYSINS
dc.subject
RECOMBINANT EXPRESSION
dc.subject
SOLUBILITY
dc.subject
STAPHYLOCOCCUS AUREUS
dc.subject.classification
Biotecnología relacionada con la Salud
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dc.subject.classification
Biotecnología de la Salud
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dc.subject.classification
CIENCIAS MÉDICAS Y DE LA SALUD
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dc.title
Evaluation of factors influencing expression and extraction of recombinant bacteriophage endolysins in Escherichia coli
dc.type
info:eu-repo/semantics/article
dc.type
info:ar-repo/semantics/artículo
dc.type
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.date.updated
2023-10-26T15:14:12Z
dc.journal.volume
21
dc.journal.number
1
dc.journal.pagination
1-19
dc.journal.pais
Reino Unido
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dc.journal.ciudad
Londres
dc.description.fil
Fil: Balaban, Cecilia Lucía. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Médicas. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario; Argentina
dc.description.fil
Fil: Suárez, Cristian Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario; Argentina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Médicas. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentina
dc.description.fil
Fil: Boncompain, Carina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario; Argentina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Médicas. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentina
dc.description.fil
Fil: Peressutti Bacci, Natalia. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Médicas. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario; Argentina
dc.description.fil
Fil: Ceccarelli, Eduardo Augusto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; Argentina
dc.description.fil
Fil: Morbidoni, Héctor Ricardo. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Médicas. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentina
dc.journal.title
Microbial Cell Factories
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dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://microbialcellfactories.biomedcentral.com/articles/10.1186/s12934-022-01766-9#citeas
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/doi/https://doi.org/10.1186/s12934-022-01766-9
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