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dc.contributor.author
Muruaga, Emanuel Javier
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Uriza, Paula Jimena
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Eckert, Gonzalo Axel Klaus
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Pepe, María Victoria
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Duarte, Cecilia Magalí
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Roset, Mara Sabrina
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dc.contributor.author
Briones, Carlos Gabriel
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dc.date.available
2023-10-25T13:49:13Z
dc.date.issued
2022-12
dc.identifier.citation
Muruaga, Emanuel Javier; Uriza, Paula Jimena; Eckert, Gonzalo Axel Klaus; Pepe, María Victoria; Duarte, Cecilia Magalí; et al.; The SLAPTAG: A new molecular tag adapted for the development of a high-performance, low-cost, affinity chromatography system; Cold Spring Harbor Laboratory Press; BioRXiv; 2023; 12-2022; 1-32
dc.identifier.uri
http://hdl.handle.net/11336/215848
dc.description.abstract
The SLAPTAG is a novel molecular TAG derived from a protein domain present in the sequence of Lactobacillus acidophilus SlpA (SlpA284-444). Proteins from different biological sources, with different molecular weights or biochemical functions, can be fused in frame to the SLAPTAG and efficiently purified by the specific binding to a bacterial-derived chromatographic matrix named here Bio-Matrix (BM). To set an optimized protocol for the SLAPTAG-based affinity chromatography (SAC) different binding and elution conditions were evaluated. The binding equilibrium between SLAPTAG and BM was reached after a few minutes at 4°C, being the apparent dissociation constant (KD) of 4.3 uM, a value similar to the one determined for other S-layer proteins and their respective bacterial cell-walls. A reporter protein was generated (H6-GFP-SLAPTAG) to compare the efficiency of SAC against a commercial system based on a Ni2+-charged agarose matrix, observing no differences in the H6-GFP-SLAPTAG purification performance. The stability and reusability of the BM were evaluated, and it was determined that the matrix was stable for more than a year, being possible to reuse it five times without a significant loss in the efficiency for protein purification. Alternatively, we explored the recovery of bound SLAP-tagged proteins by proteolysis using the SLAPASE (a SLAP-tagged version of the HRV-3c protease) that released a tag-less GFP (SLAPTAG-less). Additionally, iron nanoparticles were linked to the BM and the resulting BMmag was successfully adapted for a magnetic SAC, a technique that can be potentially applied for high-throughput-out protein production and purification.
dc.format
application/pdf
dc.language.iso
eng
dc.publisher
Cold Spring Harbor Laboratory Press
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dc.rights
info:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.uri
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ar/
dc.subject
AFFINITY CHROMATOGRAPHY
dc.subject
SLAP
dc.subject
RECOMBINANT PROTEINS
dc.subject
BACILLUS
dc.subject.classification
Bioquímica y Biología Molecular
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dc.subject.classification
Ciencias Biológicas
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dc.subject.classification
CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS
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dc.title
The SLAPTAG: A new molecular tag adapted for the development of a high-performance, low-cost, affinity chromatography system
dc.type
info:eu-repo/semantics/article
dc.type
info:ar-repo/semantics/artículo
dc.type
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.date.updated
2023-07-08T00:24:15Z
dc.identifier.eissn
2692-8205
dc.journal.volume
2023
dc.journal.pagination
1-32
dc.journal.pais
Estados Unidos
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dc.description.fil
Fil: Muruaga, Emanuel Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas; Argentina
dc.description.fil
Fil: Uriza, Paula Jimena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas; Argentina
dc.description.fil
Fil: Eckert, Gonzalo Axel Klaus. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas; Argentina
dc.description.fil
Fil: Pepe, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas; Argentina
dc.description.fil
Fil: Duarte, Cecilia Magalí. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas; Argentina
dc.description.fil
Fil: Roset, Mara Sabrina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas; Argentina
dc.description.fil
Fil: Briones, Carlos Gabriel. Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas; Argentina
dc.journal.title
BioRXiv
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2022.12.24.521862v2
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/doi/https://doi.org/10.1101/2022.12.24.521862
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