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dc.contributor.author
Malvicini, Ricardo
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dc.contributor.author
Santa Cruz, Diego Mario
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dc.contributor.author
De Lazzari, Giada
dc.contributor.author
Tolomeo, Anna Maria
dc.contributor.author
Sanmartin, Cecilia
dc.contributor.author
Muraca, Maurizio
dc.contributor.author
Yannarelli, Gustavo Gabriel
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dc.contributor.author
Pacienza, Natalia Alejandra
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dc.date.available
2023-09-08T18:01:14Z
dc.date.issued
2022-10
dc.identifier.citation
Malvicini, Ricardo; Santa Cruz, Diego Mario; De Lazzari, Giada; Tolomeo, Anna Maria; Sanmartin, Cecilia; et al.; Macrophage bioassay standardization to assess the anti-inflammatory activity of mesenchymal stromal cell-derived small extracellular vesicles; Elsevier; Cytotherapy; 24; 10; 10-2022; 999-1012
dc.identifier.issn
1465-3249
dc.identifier.uri
http://hdl.handle.net/11336/211010
dc.description.abstract
Background aims: Owing to the lack of biological assays, determining the biological activity of extracellular vesicles has proven difficult. Here the authors standardized an in vitro assay to assess the anti-inflammatory activity of mesenchymal stromal cell-derived small extracellular vesicles (MSC-sEVs) based on their ability to prevent acquisition of the M1 phenotype in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 macrophages. Induction of tumor necrosis factor alpha, IL-1β, IL-6 and inducible nitric oxide synthase (iNOS) characterizes the M1 phenotype. Nitric oxide released by iNOS turns into nitrite, which can be easily quantitated in culture media by Griess reaction. Methods: The authors first tested different assay conditions in 96-well plates, including two seeding densities (2 × 104 cells/well and 4 × 104 cells/well), four LPS doses (1 ng/mL, 10 ng/mL, 100 ng/mL and 1000 ng/mL) and two time points (16 h and 24 h), in order to determine the best set-up to accurately measure nitrite concentration as an index of M1 macrophage polarization. Results: The authors found that seeding 2 × 104 cells/well and stimulating with 10 ng/mL LPS for 16 h allowed the inhibition of nitrite production by 60% with the use of dexamethasone. Using these established conditions, the authors were able to test different MSC-sEV preparations and generate dose–response curves. Moreover, the authors fully analytically validated assay performance and fulfilled cross-validation against other M1 markers. Conclusions: The authors standardized a quick, cheap and reproducible in vitro macrophage assay that allows for the evaluation and estimation of the anti-inflammatory activity of MSC-sEVs.
dc.format
application/pdf
dc.language.iso
eng
dc.publisher
Elsevier
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dc.rights
info:eu-repo/semantics/restrictedAccess
dc.rights.uri
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
dc.subject
BIOACTIVITY
dc.subject
EXTRACELLULAR VESICLES
dc.subject
IN-PROCESS ASSAY
dc.subject
MACROPHAGE POLARIZATION
dc.subject
MESENCHYMAL STROMAL CELLS
dc.subject.classification
Tecnologías que involucran la manipulación de células, tejidos, órganos o todo el organismo
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dc.subject.classification
Biotecnología de la Salud
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dc.subject.classification
CIENCIAS MÉDICAS Y DE LA SALUD
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dc.title
Macrophage bioassay standardization to assess the anti-inflammatory activity of mesenchymal stromal cell-derived small extracellular vesicles
dc.type
info:eu-repo/semantics/article
dc.type
info:ar-repo/semantics/artículo
dc.type
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.date.updated
2023-09-05T12:57:20Z
dc.journal.volume
24
dc.journal.number
10
dc.journal.pagination
999-1012
dc.journal.pais
Países Bajos
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dc.journal.ciudad
Amsterdam
dc.description.fil
Fil: Malvicini, Ricardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Medicina Traslacional, Trasplante y Bioingeniería. Fundación Favaloro. Instituto de Medicina Traslacional, Trasplante y Bioingeniería; Argentina. Università di Padova; Italia
dc.description.fil
Fil: Santa Cruz, Diego Mario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Medicina Traslacional, Trasplante y Bioingeniería. Fundación Favaloro. Instituto de Medicina Traslacional, Trasplante y Bioingeniería; Argentina
dc.description.fil
Fil: De Lazzari, Giada. Università di Padova; Italia
dc.description.fil
Fil: Tolomeo, Anna Maria. Università di Padova; Italia
dc.description.fil
Fil: Sanmartin, Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Medicina Traslacional, Trasplante y Bioingeniería. Fundación Favaloro. Instituto de Medicina Traslacional, Trasplante y Bioingeniería; Argentina
dc.description.fil
Fil: Muraca, Maurizio. Università di Padova; Italia
dc.description.fil
Fil: Yannarelli, Gustavo Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Medicina Traslacional, Trasplante y Bioingeniería. Fundación Favaloro. Instituto de Medicina Traslacional, Trasplante y Bioingeniería; Argentina
dc.description.fil
Fil: Pacienza, Natalia Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Medicina Traslacional, Trasplante y Bioingeniería. Fundación Favaloro. Instituto de Medicina Traslacional, Trasplante y Bioingeniería; Argentina
dc.journal.title
Cytotherapy
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dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S1465324922006788#keys0001
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/doi/http://dx.doi.org/10.1016/j.jcyt.2022.05.011
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