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dc.contributor.author
Villanueva, Martín Eduardo
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dc.contributor.author
Da Silva, María Angel
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dc.contributor.author
Barra, Jose Luis
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dc.contributor.author
Montich, Guillermo Gabriel
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dc.contributor.author
Bianco, Ismael Dario
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dc.contributor.author
Salinas, Silvina Rosa
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dc.date.available
2023-08-24T12:52:02Z
dc.date.issued
2022-02
dc.identifier.citation
Villanueva, Martín Eduardo; Da Silva, María Angel; Barra, Jose Luis; Montich, Guillermo Gabriel; Bianco, Ismael Dario; et al.; Biophysical characterization of the recombinant chitinase chi18-5 with potential biotechnological interest; Springer; Applied Microbiology and Biotechnology; 106; 3; 2-2022; 1185-1197
dc.identifier.issn
0175-7598
dc.identifier.uri
http://hdl.handle.net/11336/209202
dc.description.abstract
Abstract: Chitinase chi18-5 is an enzyme able to hydrolyze chitin and chitosan producing chitooligosaccharides (COS) of potential technological interest. chi18-5 is produced naturally by the fungus Trichoderma atroviride. It belongs to the glycosyl hydrolase (GH) family 18 of the Carbohydrate Active Enzyme (CAZy) database and it has 83% identity compared to the well-characterized chi42 of Trichoderma harzianum. Several efforts have been made to characterize the biochemical activity of the enzyme and its structure. Here, we studied the biophysical properties of recombinant chi18-5. In order to gain insight into its structure and stability, we studied thermal denaturation by Circular Dichroism (CD), Intrinsic Fluorescence (FL), and attenuated total reflection Fourier transform infrared spectroscopy (ATR-FT-IR) at several pH between 3 and 8. We observed that the conformation of chi18-5 changes near its pI, and the transitions as a function of the temperature involved an increment in β-sheet secondary structure at the expenses of ⍺-helix. We also performed amide hydrogen exchange dynamics in selected conditions. At pH ≤ 6, the proportion of fast exchanging residues are larger than at pH ≥ 6. Our results suggest that at pH below pI, chi18-5 is in a less compact structure which may have influence in the interaction with substrate and enzyme activity. Graphical abstract: [Figure not available: see fulltext.] Key Points: • Characterization of enzyme behavior is critical for their wide applications • We produced and characterized biophysically a chitinase as a function of pH • The pH of optimum activity correlates with a less compact structure of chi18-5
dc.format
application/pdf
dc.language.iso
eng
dc.publisher
Springer
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dc.rights
info:eu-repo/semantics/restrictedAccess
dc.rights.uri
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
dc.subject
BIOPHYSICAL CHARACTERIZATION
dc.subject
CHARACTERIZATION
dc.subject
CHI18-5
dc.subject
CHITINASE
dc.subject
CIRCULAR DICHROISM
dc.subject
INFRARED SPECTROSCOPY
dc.subject.classification
Otras Ciencias Químicas
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dc.subject.classification
Ciencias Químicas
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dc.subject.classification
CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS
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dc.title
Biophysical characterization of the recombinant chitinase chi18-5 with potential biotechnological interest
dc.type
info:eu-repo/semantics/article
dc.type
info:ar-repo/semantics/artículo
dc.type
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.date.updated
2023-07-07T21:26:21Z
dc.journal.volume
106
dc.journal.number
3
dc.journal.pagination
1185-1197
dc.journal.pais
Alemania
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dc.journal.ciudad
Berlín
dc.description.fil
Fil: Villanueva, Martín Eduardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina
dc.description.fil
Fil: Da Silva, María Angel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; Argentina
dc.description.fil
Fil: Barra, Jose Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina
dc.description.fil
Fil: Montich, Guillermo Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina
dc.description.fil
Fil: Bianco, Ismael Dario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; Argentina
dc.description.fil
Fil: Salinas, Silvina Rosa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; Argentina
dc.journal.title
Applied Microbiology and Biotechnology
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dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://link.springer.com/article/10.1007/s00253-022-11782-9
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/doi/https://doi.org/10.1007/s00253-022-11782-9
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