Efecto del tamaño del explante en el saneamiento de vitroplantas de manioca (Manihot esculenta Crantz) infectadas con Cassava common mosaic virus

Abstract

El mosaico común de la mandioca es una de las enfermedades con mayor incidencia en plantaciones de mandioca de América Latina y llega a ocasionar pérdidas de hasta el 60% de la producción. Su agente causal, el Cassava common mosaic virus (CsCMV), se caracteriza por su fácil trasmisión mecánica a través de herramientas de trabajo y su diseminación mediante material de plantación infectado. El cultivo in vitro de meristemas es una herramienta ampliamente utilizada para erradicar patógenos sistémicos; sin embargo, la distribución de los mismos en el ápice puede variar según la interacción hospedante-patógeno, por lo que es necesario estudiar el tamaño de explante apropiado para cada patosistema. Estudios previos demostraron que al disminuir el tamaño de explante aumenta la eficiencia en la eliminación de Cassava frogskin-associated virus. Con el objeto de evaluar el efecto del tamaño de explante en la obtención de plantas de mandioca libres de CsCMV mediante cultivo in vitro, se cultivaron ápices caulinares de 10; 0,7 y 0,2 mm de longitud (tratamientos T1, T2 y T3, respectivamente) provenientes de vitroplantas de mandioca del cultivar CA 25-1, con diagnóstico positivo para CsCMV. T1 y T2 fueron cultivados en medio de multiplicación (MS más 0,01 mg/L de 6-bencilaminopurina (BAP), 0,01 mg/L de ácido naftalenacético (ANA), 0,1 mg/L de ácido giberélico (AG3), 0,75% agar), mientras que T3 (tamaño correspondiente a meristemas de mandioca) fue cultivado en medio de regeneración de plantas a partir de meristemas caulinares (MS más 0,05 mg/L de BAP, 0,02 mg/L de ANA, 1 mg/L de AG3, 0,65% agar). A los 30 días, más del 75% de los individuos fueron capaces de regenerar vástagos en todos los tratamientos. Luego de seis meses, los tratamientos fueron evaluados utilizando la técnica de RT-PCR mediante cebadores específicos para el virus. No se lograron plantas libres de CsCMV para ninguno de los tamaños estudiados. Mediante microscopía electrónica de transmisión, se corroboró la presencia de CsCMV en células meristemáticas de los ápices de las plantas regeneradas de mandioca.