Caracterización de poblaciones NK presentes en amígdalas de pacientes pediátricos infectados por EBV

Abstract

En Argentina el 90% de la población se encuentra infectada por EBV a la edad de 3 años, en su mayoría de forma asintomática. Varios estudios determinaron la participación fundamental de las células NK en el control de la infección temprana en niños de países desarrollados, y en la transformación celular mediada por EBV. Objetivo: Determinar la presencia de EBV y las distintas subpoblaciones de NK en el sitio de ingreso del virus, la amìgdala, en pacientes pediátricos. Métodos: Se estudiaron 14 pacientes amigdalectomizados (2 a 10 años). Se definió el tipo de infección por serología IgM e IgG anti EBV. Se determinó la carga viral por qPCR y se identificaron las subpoblaciones de NK (CD3,CD56,CD16,NKG2A y NKG2D) por citometría de flujo. Se realizó inmunohistoquìmica para caracterizar la presencia y funcionalidad de NK por el recuento de poblaciones CD56, CD16, IFN, GRZ B y se expresaron como células/mm2.Resultados: Se identificaron 9 pacientes primoinfectados (IgM+/IgG+o-), 5 portadores (IgM-/IgG+) y ningún paciente seronegativo. No se observaron diferencias significativas en las medias de edades de los grupos, ni en las cargas virales (p>0,05 test de t).Se observó diferencia significativa en la media del recuento de la población CD56+ en portadores vs primoinfectados (p=0,03 test de t), mientras que el resto de los marcadores analizados no mostraron diferencias significativas (p>0,05, test de t). Se encontró una tendencia a una correlación positiva entre el recuento de CD56 y la carga viral en los pacientes primoinfectados (r=0,68; p=0,0503, test correlación Spearman). No se observaron diferencias en las subpoblaciones estudiadas por citometría de flujo entre primoinfectados y portadores (p>0,05 test de t), ni correlación con la carga viral. Conclusiones: Este trabajo es el primero de la región caracterizar las células NK en el sitio de entrada y reactivación de EBV en pacientes pediátricos. La baja carga viral observada en primoinfectados podría ser responsable de la infección asintomática, y de la escasa presencia de células NK en el sitio de ingreso. Por otro lado, el aumento de dicha población en portadores podría estar asociado a eventuales reactivaciones. Se describió in vitro que la población NKG2A+NKG2D+ cumpliría un rol importante en el control de la infección, sin embargo, no prevaleció dicha población en el marco de la primoinfección por EBV, indicando que no estaría cumpliendo un rol predominante.