Efecto de la tolerancia a la desecación y performance de protocolos de criopreservación en la viabilidad de semillas citrus

Abstract

Las semillas de Citrus limon L. Burm cv. Eureka es un recurso estratégico para Argentina que actualmente se encuentra entre los diez principales productores de cítricos a nivel mundial. La criopreservación de su germoplasma por períodos prolongados es de gran importancia para mantener dicho recurso genético. La conservación de semillas de cítricos a mediano y largo plazo requiere analizar su tolerancia a la desecación. Se sometieron semillas Citrus limon L. Burm cv. Eureka a 8 condiciones de humedad relativa de equilibrio (HR%) en un rango 11-85 % a 20 ºC y una condición de secado en silica gel hasta alcanzar 5 % de humedad (%H, base humeda), evaluando el porcentaje de germinación (%G). Las semillas toleraron condiciones de desecación entre 11 y 85 %HR alcanzando contenidos de agua finales entre 9.1 y 25.1 %H (b.h.), el secado en silica gel hasta un 5 %H provoco una disminución significativa en la viabilidad medida mediante el %G y la prueba de Tetrazolio. Esto indica que la especie estudiada presento un comportamiento intermedio. Las isotermas de sorción se determinaron y modelaron usando las ecuaciones GAB y D´Arcy & Watt. La calorimetría diferencial de barrido se utilizó para identificar las transiciones térmicas de lípidos y agua en la semilla. La criopreservación en nitrógeno líquido se evaluó para diferentes protocolos: i) Convencional: semillas colocadas dentro de crioviales cerrados (P1) y ii) Ultrarrápido: semillas recubiertas de aluminio colocadas en crioviales perforados (P2). Las velocidades de enfriamiento y calentamiento fueron 500 % más altas para P2 que para P1. Para ambos protocolos de criopreservación, los valores máximos de viabilidad (%G = 83.3) se presentaron para semillas con aw = 0.64, disminuyendo sin diferencias significativas entre los protocolos para aw ≥ 0.8 y aw <0.33. La pérdida de viabilidad a altos valores de aw, se atribuye a la formación de hielo y para el rango de bajos aw a las transiciones térmicas de lípidos. El protocolo con mayores velocidades de enfriamiento/calentamiento (P2) mostraron un mejor performance que P1 disminuyendo los efectos negativos de las transiciones térmicas de lípidos y agua y logrando mantener una mayor viabilidad de la semilla; este protocolo es adecuado en un rango más amplio de condiciones de desecación en el rango (0.54)