La vía de la fosfolipasa D en procesos fagocíticos del epitelio pigmentario de la retina

Abstract

Objetivo: Previamente demostramos que las fos-folipasas D (PLD1 y PLD2) median la respuesta inflamatoria y la autofagia en las células del epitelio pigmentario (RPE) expuestas a lipopolisacárido (LPS) y a altas concentraciones de glucosa (HG). El objetivo del presente trabajo es estudiar el rol de las PLD en los procesos fagocíticos del RPE.Materiales y métodos: Se utilizó LPS (25 μg/ml) y HG (33 mM) para inducir la respuesta inflamatoria en las células ARPE-19 y ABC (una nueva línea celular de RPE humana). Para eva-luar la fagocitosis se utilizaron pHrodo™ Red E. coli BioParticles® y segmentos externos de foto-rreceptores bovinos (POS).Resultados: Las células ABC expresan PLD1 y PLD2. Dado que el ácido fosfatídico generado por las PLD activa el complejo mTORC1 (mam-malian target of rapamycin), principal inhibidor de la autofagia, estudiamos el efecto del silencia-miento de las PLD en la vía mTOR/S6K. En las células ABC el silenciamiento de PLD1 y PLD2 redujo la activación de S6K, en concordancia con el aumento de la autofagia previamente obser-vado con los inhibidores de las PLD. En células ARPE-19, la exposición a HG y a LPS redujo la fagocitosis de las biopartículas mientras que los inhibidores de PLD1 y PLD2 no afectaron este proceso en condiciones basales. De manera simi-lar, el silenciamiento de ambas PLD no afectó la fagocitosis basal de POS en las células ABC. Conclusiones: Nuestros resultados demuestran la expresión de las PLD clásicas en una nueva línea celular de RPE y su rol en la modulación de la vía mTOR/S6K. Resta aún dilucidar el rol de las PLD en los procesos fagocíticos del RPE bajo condiciones de inflamación