Síntesis y evaluación biológica de pequeñas moléculas inhibidoras de la entrada del virus de la diarrea viral bovina

Abstract

El virus de la diarrea viral bovina (BVDV) es un patógeno animal de impactoeconómico cercanamente relacionado al virus de la hepatitis C (HCV). La partícula viralcomprende una membrana lipídica asociada a dos glicoproteínas de envoltura E1 y E2.En el proceso de entrada del BVDV, E2 es el principal determinante para la interaccióndel virus con receptores de superficie de la célula que median la internalización porendocitosis de la partícula viral y es esencial en la fusión de la envoltura del virus con lamembrana del endosoma para liberar el genoma de RNA en el citoplasma de la célulainfectada. La reciente determinación de la estructura cristalina de E2 sugiere que lasproteínas de envoltura de BVDV y HCV comparten características estructurales yfuncionales con implicaciones únicas en el mecanismo de entrada de estos virus.Diversos trabajos han reportado una molécula llamada HCV-II capaz de inhibir laentrada del virus a través de la interacción con aminoácidos hidrofóbicos ubicados en laregión IIIc de E2 de HCV. A partir de estos resultados, utilizamos dicha estructura comomolde para el diseño de moléculas que se unan a la proteína E2 para inhibir la entradade BVDV a la célula. Sintetizamos una serie de compuestos derivados de 1,4-dihidropirimidinas (DHPs) vía una reacción multicomponente (3-CR) de Biginelli yHantzsch. Varios de estos compuestos presentaron actividad antiviral en el orden de nMcon un buen índice terapéutico. Se realizaron estudios SAR determinando losrequerimientos estructurales necesarios para la actividad biológica. Mediante ensayos detiempo de adición se demostró que estos compuestos inhiben la etapa de adsorción delvirus a la célula huésped. Estudios de docking molecular indicaron que presentan fuertesinteracciones con aminoácidos ubicados en el cluster del dominio IIIc.Además de probar la actividad antiviral, evaluamos que estos compuestos seanestables en las condiciones fisiológicas para poder ser aplicados in vivo. Con este fin, serealizaron diferentes ensayos: estabilidad química a diferentes pH; estabilidad plasmática(plasma bovino y murino); estabilidad metabólica (microsomas murinos); y estabilidad enfluido gástrico simulado.En conclusión, se obtuvieron diversas moléculas derivadas de DHPs con capacidadde inhibir la etapa de adsorción de la infección. A partir de estos resultados, estamossintetizando los enantiómeros (+) y (-) de DHPs para evaluar la actividad antiviral deambos estereoisómeros.