Selección de cepas fúngicas tolerantes a 2,4-d como potenciales agentes biorremediadores de herbicidas en aguas residuales

Abstract

La actividad agrícola es el principal sustento agroeconómico del país, lo que trae aparejado la utilización de una gran cantidad de herbicidas. Dentro de ellos, el ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) es uno de los más utilizados en Latinoamérica para el control de malezas anchas. Diversas industrias agrícolas producen al año miles de toneladas de 2,4-D, generando y liberando al ambiente grandes volúmenes de aguas residuales contaminadas con este herbicida con concentraciones de hasta 0,5 g/L (equivalente a 1mM 2,4-D) lo que genera un impacto sumamente negativo. Los hongos filamentosos son una importante herramienta biotecnológica por su capacidad de detoxificar y degradar estos compuestos en el ambiente. El objetivo de este trabajo fue aislar la micobiota fúngica presente en suelos expuestos a derrames accidentales de 2,4-D y evaluar la posible tolerancia de las mismas frente a diferentes concentraciones del herbicida en estudio. Se realizó un aislamiento de la micobiota presente en suelos, en medio diclorán rosa de bengala cloranfenicol (DRBC), suplementado con 10 mM de 2,4-D como fuente de carbono. Luego se realizaron subcultivos de las cepas asiladas y se identificaron en base a sus caracteres morfológicos. Los ensayos de tolerancia se realizaron inoculando, suspensiones de conidios de cada cepa, por punción central en el medio Czapek Dox (CZD) suplementado con 15, 20, 25 y 30 mM de 2,4-D como fuente carbonada. Se incubaron a 28°C durante 15 días y al final del período de incubación se registró el desarrollo de las cepas tolerantes. El crecimiento de colonias típicas se consideró “tolerante” y sin desarrollo se consideró “no tolerante”. Se aislaron en total 179 cepas, en donde los mayores géneros aislados fueron Fusarium, Aspergillus y Penicillium con porcentajes del 51, 7 y 5% respectivamente. Además, se aislaron dos cepas pertenecientes al género Mucor. Respecto a la tolerancia se observó que el 26% de las cepas de Fusarium spp., el 77% de Aspergillus spp., el 67% de Penicillium spp y el 50% de Mucor spp. fueron capaces de desarrollar y tolerar hasta 25 mM de 2,4-D. A 30 mM no se evidenció desarrollo en ninguna cepa. Estos resultados muestran la capacidad de diversas especies fúngicas de tolerar hasta 25 mM de 2,4-D; concentraciones significantemente mayores a las presentes en sitios de derrames o efluentes industriales contaminados. La tolerancia observada sugiere que estas cepas pueden considerarse potenciales degradadoras del herbicida, al utilizarlo como fuente de carbono y energía; pudiendo ser evaluadas a futuro en estrategias de bioaugmentación en sitios contaminados con plaguicidas.