Validación de un método para cuantificar tulatromicina en tejidos bovinos mediante cromatografía líquida de alta performance con detección por espectrometría de masas

Abstract

La tulatromicina es un antimicrobiano aprobado para el tratamiento de enfermedades respiratorias de bovinos. Dada la importancia del uso de este antibiótico en los animales, se validó un método analítico basado en cromatografía liquida de alta performance en tandem con ionización por electrospray y detección por espectrometría de masas/masas (LC ESI MS/MS) para cuantificar tulatromicina en diferentes tejidos bovinos, de acuerdo a normas de Agencias Regulatorias Nacionales e Internacionales. El procedimiento optimizado implicó la homogeneización de la muestra con acetato de etilo y ácido clorhídrico, e hidrólisis de la fase acuosa resultante, para convertir la tulatromicina y sus metabolitos en el residuo marcador (2R, 3S, 4R, 5R, 8R, 10R, 11R, 12S, 13S, 14R) -2-etil-3,4,10,13-tetrahidroxi-3, 5,8,10,12,14-hexametil-11 – [[3,4,6-tridesoxi-3- (dimetilamino) -β-D-xilohexopiranosil] oxi] -1-oxa-6-azaciclopentadecan-15-ona, conocido como CP-60,300. Seguidamente, se realizó una limpieza del extracto acuoso mediante un cartucho de intercambio catiónico y posterior análisis por LC ESI MS/MS. La metodología analítica propuesta fue validada cumpliéndose los criterios de aceptación establecidos por los organismos de referencia en la temática, demostrando ser adecuada para el análisis de residuos de tulatromicina en tejidos bovinos con fines reglamentarios.

Tulathromycin is an approved antimicrobial used in cattle to treat respiratory diseases. An analytical method based on high performance liquid chromatography in tandem with electrospray ionization and detection by mass / mass spectrometry (LC ESI MS / MS) was validated to quantify tulathromycin in different bovine tissues according to standards of National and International Regulatory Agencies. The optimized procedure involved homogenizing the sample with ethyl acetate and hydrochloric acid, hydrolysis of the resulting aqueous layer to convert tulathromycin and its metabolites into the marker residue (2R, 3S, 4R, 5R, 8R, 10R, 11R, 12S, 13S, 14R) -2-etil-3,4,10,13-tetrahidroxi-3, 5,8,10,12,14-hexametil-11 – [[3,4,6-tridesoxi-3- (dimetilamino) -β-D-xilohexopiranosil] oxi] -1-oxa-6-azaciclopentadecan-15-ona, also known as CP-60,300, cleaning by using a cation exchange cartridge and subsequent analysis by LC ESI MS/MS. The proposed analytical methodology was validated meeting the acceptance criteria established by the reference organisms, proving to be adequate for the analysis of tulathromycin residues in bovine tissues for regulatory purposes.