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dc.contributor.author
de la Fourniere, Sofía Ana María
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dc.contributor.author
Paoletta, Martina Soledad
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dc.contributor.author
Guillemi, Eliana Carolina
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dc.contributor.author
Sarmiento, Néstor Fabián
dc.contributor.author
Donati, Pablo Alejandro
dc.contributor.author
Wilkowsky, Silvina Elizabeth
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dc.contributor.author
Farber, Marisa Diana
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dc.date.available
2023-01-13T14:18:16Z
dc.date.issued
2021-08
dc.identifier.citation
de la Fourniere, Sofía Ana María; Paoletta, Martina Soledad; Guillemi, Eliana Carolina; Sarmiento, Néstor Fabián; Donati, Pablo Alejandro; et al.; Development of highly sensitive one step-PCR tests for improved detection of B. bigemina and B. bovis; Elsevier Science; Veterinary Parasitology; 296; 8-2021; 1-7
dc.identifier.issn
0304-4017
dc.identifier.uri
http://hdl.handle.net/11336/184674
dc.description.abstract
Bovine babesiosis caused by Babesia bigemina and B. bovis is an economically relevant tick-borne disease distributed over tropical and subtropical world regions. Animals that recover from the clinical disease can remain persistently infected, and those carriers are epidemiologically relevant since they can act as a source of infection to other animals through the tick bite. According to the manual of the World Organisation for Animal Health (OIE), the recommended molecular diagnosis test for both parasites is a nested polymerase chain reaction (nPCR) based on an amplification of a fragment of the rap-1 gene. Since nPCRs are time consuming, have a higher cost and risk of contamination, we propose a single step PCR for B. bigemina (BbiVESA) and B. bovis (BboVESA) based on the amplification of the multi-copy ves-1α gene. We developed these methods and we achieved a detection limit of 1 × 10−12 % parasitemia for B. bigemina and of 1 × 10−6 % for B. bovis using reference strains, which compared to the reference OIE tests, results in an improvement in sensitivity of six orders for B. bigemina. Finally, we tested 48 field samples from a babesiosis enzootic region where we were able to detect a higher proportion of positive animals with both VESA methods than with the reference rap-1 nPCRs. This difference was statistically significant for each Babesia species. Concordance between both diagnostic schemes based on Cohen's kappa coefficient showed minimal to non-agreement (κ = 0.32) for B. bigemina and non-agreement (κ = 0.16) for B. bovis since BbiVESA and BboVESA PCR tests showed a significantly higher detection capacity. In conclusion, the high sensitivity of the assay, together with the lower demand of time and reagents make the VESA PCR methods developed here a valuable diagnostic tool for the molecular detection and epidemiological survey of both Babesia pathogens.
dc.format
application/pdf
dc.language.iso
eng
dc.publisher
Elsevier Science
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dc.rights
info:eu-repo/semantics/restrictedAccess
dc.rights.uri
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
dc.subject
BABESIA BIGEMINA
dc.subject
BABESIA BOVIS
dc.subject
DIAGNOSIS
dc.subject
PERSISTENT INFECTION
dc.subject
POLYMERASE CHAIN REACTION
dc.subject
VES-1Α GENE
dc.subject.classification
Bioquímica y Biología Molecular
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dc.subject.classification
Ciencias Biológicas
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dc.subject.classification
CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS
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dc.title
Development of highly sensitive one step-PCR tests for improved detection of B. bigemina and B. bovis
dc.type
info:eu-repo/semantics/article
dc.type
info:ar-repo/semantics/artículo
dc.type
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.date.updated
2022-09-21T11:22:13Z
dc.journal.volume
296
dc.journal.pagination
1-7
dc.journal.pais
Países Bajos
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dc.journal.ciudad
Amsterdam
dc.description.fil
Fil: de la Fourniere, Sofía Ana María. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; Argentina
dc.description.fil
Fil: Paoletta, Martina Soledad. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; Argentina
dc.description.fil
Fil: Guillemi, Eliana Carolina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; Argentina
dc.description.fil
Fil: Sarmiento, Néstor Fabián. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Corrientes. Estación Experimental Agropecuaria Mercedes; Argentina
dc.description.fil
Fil: Donati, Pablo Alejandro. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Cs.veterinarias. Cátedra de Anestesiología y Algiologia; Argentina
dc.description.fil
Fil: Wilkowsky, Silvina Elizabeth. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; Argentina
dc.description.fil
Fil: Farber, Marisa Diana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; Argentina
dc.journal.title
Veterinary Parasitology
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dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0304401721001527
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/doi/https://doi.org/10.1016/j.vetpar.2021.109493
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