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dc.contributor.author
Bello, Oscar Daniel
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dc.contributor.author
Auclair, Sarah M.
dc.contributor.author
Rothman, James E.
dc.contributor.author
Krishnakumar, Shyam S.
dc.date.available
2023-01-03T10:55:47Z
dc.date.issued
2016-03
dc.identifier.citation
Bello, Oscar Daniel; Auclair, Sarah M.; Rothman, James E.; Krishnakumar, Shyam S.; Using ApoE Nanolipoprotein Particles to Analyze SNARE-Induced Fusion Pores; American Chemical Society; Langmuir; 32; 12; 3-2016; 3015-3023
dc.identifier.issn
0743-7463
dc.identifier.uri
http://hdl.handle.net/11336/183052
dc.description.abstract
Here we introduce ApoE-based nanolipoprotein particle (NLP) - a soluble, discoidal bilayer mimetic of ∼23 nm in diameter, as fusion partners to study the dynamics of fusion pores induced by SNARE proteins. Using in vitro lipid mixing and content release assays, we report that NLPs reconstituted with synaptic v-SNARE VAMP2 (vNLP) fuse with liposomes containing the cognate t-SNARE (Syntaxin1/SNAP25) partner, with the resulting fusion pore opening directly to the external buffer. Efflux of encapsulated fluorescent dextrans of different sizes show that unlike the smaller nanodiscs, these larger NLPs accommodate the expansion of the fusion pore to at least ∼9 nm, and dithionite quenching of fluorescent lipid introduced in vNLP confirms that the NLP fusion pores are short-lived and eventually reseal. The NLPs also have capacity to accommodate larger number of proteins and using vNLPs with defined number of VAMP2 protein, including physiologically relevant copy numbers, we find that 3-4 copies of VAMP2 (minimum 2 per face) are required to keep a nascent fusion pore open, and the SNARE proteins act cooperatively to dilate the nascent fusion pore.
dc.format
application/pdf
dc.language.iso
eng
dc.publisher
American Chemical Society
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dc.rights
info:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.uri
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
dc.subject
NANOLIPOPROTEIN PARTICLES
dc.subject
APOE
dc.subject
SNARE
dc.subject
FUSION PORE
dc.subject
NANODISC
dc.subject.classification
Biofísica
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dc.subject.classification
Ciencias Biológicas
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dc.subject.classification
CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS
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dc.subject.classification
Bioquímica y Biología Molecular
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dc.subject.classification
Ciencias Biológicas
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CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS
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dc.subject.classification
Otras Nanotecnología
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dc.subject.classification
Nanotecnología
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dc.subject.classification
INGENIERÍAS Y TECNOLOGÍAS
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dc.title
Using ApoE Nanolipoprotein Particles to Analyze SNARE-Induced Fusion Pores
dc.type
info:eu-repo/semantics/article
dc.type
info:ar-repo/semantics/artículo
dc.type
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.date.updated
2022-12-27T18:07:33Z
dc.identifier.eissn
1520-5827
dc.journal.volume
32
dc.journal.number
12
dc.journal.pagination
3015-3023
dc.journal.pais
Estados Unidos
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dc.journal.ciudad
Nueva York
dc.description.fil
Fil: Bello, Oscar Daniel. University of Yale. School of Medicine; Estados Unidos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mendoza. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos. Universidad Nacional de Cuyo. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Histología y Embriología de Mendoza Dr. Mario H. Burgos; Argentina
dc.description.fil
Fil: Auclair, Sarah M.. University of Yale. School of Medicine; Estados Unidos
dc.description.fil
Fil: Rothman, James E.. University of Yale. School of Medicine; Estados Unidos
dc.description.fil
Fil: Krishnakumar, Shyam S.. University of Yale. School of Medicine; Estados Unidos
dc.journal.title
Langmuir
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dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/http://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.langmuir.6b00245
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/doi/http://dx.doi.org/10.1021/acs.langmuir.6b00245
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