Implicancia del cambio de la expresión génica y proteica de TNF-alfa y sus receptores en la infección del sistema respiratorio bovino por herpesvirus bovino tipo 1 y 5

Abstract

La información disponible acerca de la respuesta inflamatoria desencadenada por diferentes alfaherpesvirus en los sitios de replicación primaria es escasa. El objetivo de este trabajo fue describir los cambios en la expresión génica y proteica de TNF-α y de sus receptores en el sistema respiratorio de bovinos infectados con herpesvirus bovino (BoHV) tipo 1 y 5 durante las distintas etapas del ciclo infeccioso. Se utilizaron 14 terneros, 2 por cada grupo experimental, inoculados con BoHV-1 o 5 para inducir infección aguda [6 días post-infección (dpi)], latencia (24 dpi) o reactivación mediante inmunosupresión con dexametasona (25 dpi) y 2 terneros control. Luego de la eutanasia, se recogieron diferentes muestras de sistema respiratorio (ganglios linfáticos retrofaríngeos, epitelio de mucosa nasal y tráquea y pulmón) para los estudios de expresión génica mediante Real Time RT-PCR y proteica mediante Western Blot. Los niveles de ARNm de TNFα se redujeron en los ganglios retrofaríngeos durante la infección aguda y reactivación viral, entre 0,06 y 0,98 veces con respecto a animales control. En la tráquea, aumentó notablemente durante la infección aguda por BoHV-1 (6,5 veces) y BoHV-5 (32,94 veces). En la mucosa nasal y pulmón, el ARNm de esta citoquina se detectó únicamente durante la reactivación de BoHV-1. No se detectó durante la latencia en ninguna de las muestras analizadas. Con respecto a los niveles proteicos de TNFα, a los 6 dpi se detectó un aumento significativo en el epitelio traqueal. Por el contrario, se registró una disminución en los niveles de proteína en los ganglios retrofaríngeos durante la reactivación de ambos virus y en la tráquea para BoHV-5. El ARNm de los receptores de TNFα, TNFR1 y 2, fue en general regulado positivamente a los 6 dpi, con un aumento significativo (2,25 a 6,45 veces) en la mucosa nasal y tráquea. Durante la latencia de BoHV-1, se observaron cambios significativos en la tráquea para TNFR1 (1,98 veces) y TNFR2 (0,05 veces). La reactivación de ambos virus disminuyó los niveles de TNFR1 en los ganglios linfáticos y mucosa nasal y en el pulmón sólo para BoHV-1. Sin embargo, se observó una importante expresión en la tráquea para ambos virus y el pulmón para la reactivación de BoHV-5 (12 a 16 veces). Respecto a la expresión de TNFR2, se observó una sobre-regulación (1,9 veces) en los ganglios retrofaríngeos durante la reactivación de BoHV-5. Los hallazgos descriptos en este trabajo demuestran la implicancia de la modulación diferencial de la expresión de TNFα y sus receptores durante la infección por dos alfaherpesvirus bovinos, particularmente durante la infección aguda y la reactivación. Por lo tanto, el estudio detallado del proceso inflamatorio y las moléculas involucradas en los distintos estadios de la infección nos brindará futuras herramientas para la prevención o control de los frecuentes brotes respiratorios causados por estos importantes patógenos del ganado.