Establecimiento de un Modelo Experimental de Muerte Encefilica en Ratas para investigackin en Trasplante de Intestino

Abstract

El trasplante intestinal experimental en ratas, es una herramienta muy utilizada en el estudio de la injuria por isquemia-reperfusion y rechazo. Aun asi, en la mayoria de estos protocolos se utilizan donantes vivos. Con el objetivo de generar un modelo mss cercano a la realidad clinica, nuestro trabajo pretende incluir a la muerte encefalica para analizar el impacto de este proceso en la biologia del trasplante de intestino. Materiales y metodos: Se utilizaron ratas Wistar divididas dos grupos, uno con muerte encefalica y un grupo control con ventilacion asistida. Ambos grupos fueron mantenidos en dichas condiciones durante 2 hs. y posteriormente se tomaron las muestras correspondientes. Se estudio el deo histologic° general y focal, mediante la escala de Park, y se realize la medicion del Indice Vellosidad/Cripta y el conteo de celulas Goblet. Resultados: El valor promedio en el grupo con ventilacion asistida fue 0±0 y para el grupo Muerte Encefalica fue de 0.8±0.83 (p=0.1729). Mientras tanto el dafio focal fue VA=0.5±0.57 y ME=1.6±0.54 (p=0.0270). El indice Vellosidad/Cripta se vie disminuido en el grupo ME, 2.64±0.65 vs 3.06±0.75 para el grupo control (p=0.0007). El conteo de celulas Goblet por cads 25 vello¬sidades fue de 763.8±120.1 para VA y de 531 ±103.5 para ME (p=0.0317). Conclusiones: Con este trabajo pudimos establecer un modelo confiable de muerte encefalica en ratas, que permits estudiar el impacto de la misma en el injerto intestinal destinado al trasplante. Nuestros resultados muestran que la muerte encefalica impacta negativamente, tomando como parametros la arquitectura del tejido, el piano funcional dado por el IVC y en las primeras barreras de defensa del intestino, en el caso de las celulas Goblet.

Experimental intestinal transplantation in rats is a widely used tool in the study of ischemia reperfusion injury and rejection. Even so, live donors are used in the majority of these protocols. With the aim of generate a model closer to the clinical reality, our study intends to introduce brain death (BD) protocol to analyze the impact of biological processes associated with ITx. Materials and methods: Wistar rats divided into two groups, one under brain death (n=5) and a control group with assisted ventilation (n=4). Both groups were maintained in these conditions for 2 hours and subsequently the corresponding samples were taken. The general and focal histological damage was studied using the Park scale, the Villi/Crypt Index was measured and a counting for Goblet cells. Results: The general injury for the VA group was 0 ± 0 and for the ME group it was 0.8 ± 0.83 (p=0.1729). Meanwhile the focal damage was VA=0.5 ± 0.57 and ME=1.6 ± 0.54 (p=0.0270). The Villi/Crypt Index was low in the ME group, 2.64 ± 0.65 vs. 3.06 ± 0.75 for the control group (p=0.0007). The Goblet cell count every 25 villi was 763.8 ± 120.1 for VA and 531 ± 103.5 for ME (p=0.0317). Conclusions: With this work we were able to establish a reliable model of brain death in rats, which allows us to study its impact on the intestinal graft desti¬ned for transplantation. Our results show that brain death has a negative impact on the graft, taking as parameters the architecture of the tissue, functionality given by the IVC and the first bowel defense barriers, in the case of Goblet cells.