Microscopia correlativa para caracterizar biofilms microbianos en superficies y dispositivos en el ámbito médico-asistencial

Abstract

El objetivo de este trabajo fue identificar y caracterizar las comunidades microbianas presentes en el ámbito médico-asistencial. Se tomaron muestras por duplicado mediante cinta de papel e hisopado y siembra en placas con medio de cultivo LB pH7 adicionado con antibióticos Cicloheximida (CH) y Ciclohehimida más Ácido Nalidixico (CH/NA). Los sitios de muestreo fueron: mesadas, aire acondicionado y equipamientos, de los Servicios de Producción, Distribución y Biología Molecular del Banco Central de Sangre Dr. César Guerra, (PRIS-SI.PRO.SA). El análisis de las cintas aplicando microscopía electrónica de barrido (SEM, Scannig Electron Microscopy) permitió detectar biofilms en los diferentes sitios de muestreo. Los mismos presentaron una organización tridimensional compleja caracterizada por microorganismos dispuestos en capas inmersas en abundante material extracelular. Los cultivos permitieron aislar 45 colonias (gram + y gram ) que exhibieron diversos morfotipos (cocos, bacilos y cocobacilos) de mesadas, aire acondicionado y equipos. Mediante SEM fue posible analizar en detalle la estructura topográfica, organización y morfología de las bacterias aisladas. Se observó además, que algunas colonias establecían contactos estrechos. SEM reveló un amplio espectro de relaciones entre ellas. Fue posible poner en evidencia cambios morfológicos en las bacterias como también la presencia de gran cantidad de material extracelular en los sitios de interacción. También, se identificaron diferencias en la conformación ultraestructural de distintos sectores de algunas colonias. Este trabajo propone a las técnicas de microscopía de alta resolución como herramientas claves para el estudio in-situ de biofilms en superficies del ámbito médico-asistencial, dada la estrecha la estrecha relación que presentan con las enfermedades humanas.