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dc.contributor.author
Svitek, Nicholas
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dc.contributor.author
Hansen, Andreas Martin
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dc.contributor.author
Steinaa, Lucilla
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dc.contributor.author
Saya, Rosemary
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Awino, Elias
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dc.contributor.author
Nielsen, Morten
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dc.contributor.author
Buus, Søren
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dc.contributor.author
Nene, Vishvanath
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dc.date.available
2017-06-12T21:15:00Z
dc.date.issued
2014-04
dc.identifier.citation
Svitek, Nicholas; Hansen, Andreas Martin; Steinaa, Lucilla; Saya, Rosemary; Awino, Elias; et al.; Use of “one-pot, mix-and-read” peptide-MHC class I tetramers and predictive algorithms to improve detection of cytotoxic T lymphocyte responses in cattle; BioMed Central; Veterinary Research; 45; 1; 4-2014; 45-50
dc.identifier.issn
0928-4249
dc.identifier.uri
http://hdl.handle.net/11336/18051
dc.description.abstract
Peptide-major histocompatibility complex (p-MHC) class I tetramer complexes have facilitated the early detection and functional characterisation of epitope specific CD8+ cytotoxic T lymphocytes (CTL). Here, we report on the generation of seven recombinant bovine leukocyte antigens (BoLA) and recombinant bovine β2-microglobulin from which p-MHC class I tetramers can be derived in ~48 h. We validated a set of p-MHC class I tetramers against a panel of CTL lines specific to seven epitopes on five different antigens of Theileria parva, a protozoan pathogen causing the lethal bovine disease East Coast fever. One of the p-MHC class I tetramers was tested in ex vivo assays and we detected T. parva specific CTL in peripheral blood of cattle at day 15-17 post-immunization with a live parasite vaccine. The algorithm NetMHCpan predicted alternative epitope sequences for some of the T. parva CTL epitopes. Using an ELISA assay to measure peptide-BoLA monomer formation and p-MHC class I tetramers of new specificity, we demonstrate that a predicted alternative epitope Tp229-37 rather than the previously reported Tp227-37 epitope is the correct Tp2 epitope presented by BoLA-6*04101. We also verified the prediction by NetMHCpan that the Tp587-95 epitope reported as BoLA-T5 restricted can also be presented by BoLA-1*02301, a molecule similar in sequence to BoLA-T5. In addition, Tp587-95 specific bovine CTL were simultaneously stained by Tp5-BoLA-1*02301 and Tp5-BoLA-T5 tetramers suggesting that one T cell receptor can bind to two different BoLA MHC class I molecules presenting the Tp587-95 epitope and that these BoLA molecules fall into a single functional supertype.
dc.format
application/pdf
dc.language.iso
eng
dc.publisher
BioMed Central
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dc.rights
info:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.uri
https://creativecommons.org/licenses/by/2.5/ar/
dc.subject
Bola/Mhc
dc.subject
Ctl Epitope
dc.subject
Tetramer
dc.subject.classification
Otras Ciencias de la Salud
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dc.subject.classification
Ciencias de la Salud
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dc.subject.classification
CIENCIAS MÉDICAS Y DE LA SALUD
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dc.title
Use of “one-pot, mix-and-read” peptide-MHC class I tetramers and predictive algorithms to improve detection of cytotoxic T lymphocyte responses in cattle
dc.type
info:eu-repo/semantics/article
dc.type
info:ar-repo/semantics/artículo
dc.type
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.date.updated
2017-06-09T15:01:01Z
dc.identifier.eissn
1297-9716
dc.journal.volume
45
dc.journal.number
1
dc.journal.pagination
45-50
dc.journal.pais
Reino Unido
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dc.journal.ciudad
Londres
dc.description.fil
Fil: Svitek, Nicholas. International Livestock Research Institute; Kenia
dc.description.fil
Fil: Hansen, Andreas Martin. Universidad de Copenhagen; Dinamarca
dc.description.fil
Fil: Steinaa, Lucilla. International Livestock Research Institute; Kenia
dc.description.fil
Fil: Saya, Rosemary. International Livestock Research Institute; Kenia
dc.description.fil
Fil: Awino, Elias. International Livestock Research Institute; Kenia
dc.description.fil
Fil: Nielsen, Morten. Technical University of Denmark; Dinamarca. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas; Argentina
dc.description.fil
Fil: Buus, Søren. Universidad de Copenhagen; Dinamarca
dc.description.fil
Fil: Nene, Vishvanath. International Livestock Research Institute; Kenia
dc.journal.title
Veterinary Research
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dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/http://dx.doi.org/10.1186/1297-9716-45-50
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://veterinaryresearch.biomedcentral.com/articles/10.1186/1297-9716-45-50
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4018993/
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