Determinación de sauroxina en tejidos de animales sometidos al test de natación forzada

Abstract

La Depresión es una patología grave y debilitante, que requiere de fármacos más efectivos y seguros, ya que los actuales deben administrarse largos períodos de tiempo y presentan efectos secundarios importantes. Además, existe una relación entre déficit de memoria y Depresión, siendo esta última un síntoma y un factor de riesgo para enfermedades como la de Alzheimer. Habiendo demostrado que los alcaloides de Phlegmariurus saururus (Lam.) B. Øllg. [ex Huperzia saururus (Lam.) Trevis.] (Lycopodiaceae) modulan fenómenos mnemónicos, en estudios previos describimos el efecto antidepresivo del extracto alcaloidal (EA) de la especie, a través del test de natación forzada (Vallejo y col., 2016). Un potencial agente antidepresivo debe atravesar la barrera hematoencefálica (BHE) por lo que el objetivo de este estudio fue determinar la concentración de sauroxina (Sx) (uno de los alcaloides de P. saururus) en cerebro y plasma, en tejidos extraídos de las ratas Wistar adultas a las que se les administró el EA, sometidas luego al test conductual mencionado. Para tal fin, se sacrificó a los animales mediante decapitación previa sedación con CO2, inmediatamente después de someterlos al test. Se reservaron el plasma (Pl) y el cerebro (Ce); el primero fue alcalinizado mediante buffer a pH 10 y extraído diez veces con cloroformo, reuniendo las alícuotas y llevando a sequedad. Los cerebros fueron homogenizados en solución fisiológica, y se basificó con buffer a pH 10. Luego se particionó con cloroformo, procediendo como para el plasma. Ambas fracciones (Pl y Ce) fueron analizadas por CG-EM solubilizadas en acetona, realizando una curva de calibración con Sx (estándar interno: cafeína, muestras por triplicado). Como resultado, se detectó Sx en cerebro (correspondiente a la dosis de 2 mg/kg de animal), en 0,0011 mg/kg de tejido. No se observó su presencia en plasma, hecho que condice con el comportamiento observado para otros derivados de alcaloides de P. saururus (Vallejo y col., 2014). Como conclusión, se destaca el hecho de que Sx es detectada en cerebro, a pesar de haber sido administrada como parte del EA y no en forma pura, con lo cual atraviesa BHE a pesar de estar en bajas concentraciones.