Escherichia coli verotoxigénico: detección de la isla de patogenicidad (OI)-122 y su asociación con seropatotipos en cepas no-O157 aisladas en Argentina

Abstract

Escherichia coli verotoxigénico (VTEC) es un grupo heterogéneo de patógenos, asociado a enfermedades humanas tales como colitis hemorrágica (CH) y síndrome urémico hemolítico (SUH). El bovino es el principal reservorio y las infecciones en el hombre son causadas mayormente por la ingesta de alimentos contaminados. Las Islas de Patogenicidad (PAI) juegan un importante rol en su virulencia. Debido a que, normalmente, las PAI están ausentes en cepas no patógenas, pueden ser usadas como marcadores moleculares para distinguir cepas altamente virulentas. Además de los genes localizados en la isla de patogenicidad LEE (Locus de borrado del enterocito), se han identificado varios genes efectores en otras PAI. Particularmente, la presencia de la OI-122, seasocia significativamente a cepas VTEC involucradas en brotes y casos de CH y SUH. Karmali et al. (2003) propusieron agrupar cepas de VTEC en cinco seropatotipos (SPT), denominados A-E, de acuerdo con su asociación a enfermedad severa y a la presencia de las islas LEE y OI-122. El objetivo de este estudio fue determinar la distribución de genes de la OI-122 entre cepas VTEC no-O157:H7 aisladas en Argentina de casos clínicos, alimentos y bovinos y evaluar la importancia de esta OI en los seropatotipos de VTEC. Se analizaron 204 aislamientos VTEC pertenecientes a 52 serotipos no-O157:H7. Se clasificaron en SPT de acuerdo al criterio de Karmali et al. (l.c.). Para determinar la presencia de la OI-122, compuesta por 3 módulos, se amplificaron por PCR 4 genes marcadores (Z4321, Z4326, Z4332 y Z4333) y 3 genes efectores no codificados en LEE (genes nle)(ent/espL2, nleB, nleE) localizados en diferentes regiones de la isla. De los 204 aislamientos estudiados, el 77% de ellos (157: 45 LEE-positivos y 112 LEE-negativos) fue positivo para al menos un gen de OI-122. En casi todos los aislamientos LEE-negativos, sólo estuvo presente el módulo 1 de la PAI (Z4321). El gen Z4321 fue el más prevalente (61% de los aislamientos), detectándose tanto en aislamientos LEE-negativos como positivos. La prevalencia de los demás genes fue: 22% para Z4326; 21% para nleE, Z4332 y Z4333; 17% para ent/espL2 y 10% para nleB. Se determinaron 14 perfiles de virulencia. Los aislamientos que presentaron los 4 genes marcadores(Z) fueron LEE-positivos y pertenecieron a SPT B, C o indeterminado. Los resultados mostraron diferencias en la frecuencia de los 7 genes marcadores y una gran variedad de perfiles de virulencia inter e intra serotipo.