Sistema microfluidico para el diagnóstico de enfermedad celiaca: Inmunosensor con detección electroquímica para el diagnóstico serológico alternativo de la enfermedad celíaca

Abstract

En el presente libro se describe el desarrollo de un sensor inmunomicrofluídico acoplado a detección electroquímica para la cuantificación de anticuerpos IgG anti-gliadina. Este dispositivo representa una herramienta rápida, sensible y automatizada para el diagnóstico de la enfermedad celíaca .La enfermedad celíaca (EC) es una enfermedad auto inmune generada por una fracción de proteínas del gluten llamadas prolaminas. Esta patologíaafecta a una de cada 250 personas en todo el mundo, produce inflamaciónintestinal, atrofia vellositaria e hiperplasia críptica, causantes a su vez demalnutrición y pérdida de peso entre otros.Nuestro inmuno sensor consiste en un dispositivo de plexiglás con un canal central (CC), el cual contiene en su interior vidrio de porosidad controlada modificado con grupos 3-aminopropilo (AP-CPG), en cuya superficie se inmovilizó la proteína gliadina, dicho dispositivo se encuentraademás acoplado a un electrodo de oro. La cuantificación de anticuerpos IgGanti-gliadina fue realizada empleando un enzimoinmuno análisis (EIA)heterogéneo no competitivo en microescala, en el cual los anticuerpos unidosa la proteína gliadina, inmovilizada sobre la superficie de AP-CPG contenidoen el CC, fueron determinados a través de la acción de un anticuerpo secundario específico anti-IgG humano marcado con la enzima fosfatasaalcalina (FAL). Esta enzima convierte al sustrato p-aminofenil fosfato (p-APP)en p-aminofenol (p-AP). Este producto electroactivo fue cuantificado sobre la superficie del electrodo de oro a 0,250 V.