Efecto del agregado de yema de huevo a un diluyente comercial para la refrigeración de semen de llama

Abstract

La refrigeración de semen es una biotecnología útil para la que pueden utilizarse diluyentes caseros o comerciales, presentando estos últimos ciertas ventajas sobre los primeros. Si bien no existen diluyentes comerciales diseñados específicamente para los camélidos sudamericanos (CSA), existen reportes del uso de algunos de ellos tanto en alpacas como en llamas. Aunque formulado para rumiantes, el diluyente Andromed® (AM) ha sido utilizado para refrigerar espermatozoides de CSA con resultados variables. De acuerdo al fabricante, este diluyente no requiere la adición de yema de huevo (YH), sin embargo, se conoce que la adición de la misma a algunos diluyentes mejora la criopreservación de los espermatozoides. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto del agregado de YH al diluyente AM en la refrigeración de semen de llama. La experiencia se realizó en la FCV-UBA. Se colectaron 16 eyaculados de 4 llamas que se evaluaron, dividieron en 2 alícuotas y se diluyeron con AM y AM con 20% de YH (AMYH) (0 hs), alcanzando una concentración final de 50 x 106 espermatozoides/ml. Las muestras fueron refrigeradas a 5°C en Equitainer® y se evaluaron las siguientes características seminales luego de 24 y 48 hs de conservación: movilidad, funcionalidad de membrana, viabilidad, integridad acrosomal y morfologías espermáticas. Los resultados fueron analizados utilizando un diseño factorial y un test de Kruskall-Wallis. Al diluir las muestras con AMYH (0 h) se observó una modificación en los patrones de movilidad, aumentando la movilidad progresiva y disminuyendo la movilidad oscilatoria (p˂0.05), sin observarse diferencias en la movilidad total (MT) respecto al semen fresco ni a las muestras diluidas con AM (p>0.05). Se observó una disminución de la MT en las muestras refrigeradas con AM, tanto a las 24 como a las 48 hs, con respecto al semen fresco (SF) (SF 58,6 ± 11,5%; AM24 25,1 ± 25,0% y AM48 21,0 ± 21,4%; p˂0.05). Aunque la MT disminuyó en las muestras refrigeradas con AMYH a las 48 hs de conservación respecto al SF, no se observaron diferencias a las 24 hs respecto al SF ni a las muestras diluidas (0 hs), ni tampoco entre las 0 hs y las 48 hs de refrigeración (AMYH0 53,0 ± 13,1%; AMYH24 39,8 ± 12,8% y AMYH48 30,8 ± 17,6%). El porcentaje de espermatozoides vivos intactos disminuyó en las muestras refrigeradas con AM y con AMYH a las 24 y 48 hs con respecto al SF (SF 64,0 ± 13,2%; AM24 37,0 ± 23,4%; AMYH24 42,4 ± 18,0%; AM48 30,1 ± 23,2% y AMYH48 41,6 ± 16,3%; p˂0.05). Se observó un aumento del porcentaje de espermatozoides muertos reaccionados en las muestras refrigeradas con AM a las 24 y 48 hs con respecto al SF (SF 15,9 ± 8,1%; AM24 30,4 ± 14,0% y AM48 37,0 ± 22,0%, p˂0.05). Aunque la funcionalidad de membrana y el porcentaje de espermatozoides con morfología normal se conservó en las muestras refrigeradas, se observó una disminución del porcentaje de espermatozoides con gota citoplasmática en las muestras refrigeradas con AMYH (24 y 48 hs) con respecto al SF (p˂0.05). El agregado de YH al diluyente AM posee un impacto positivo en la refrigeración de espermatozoides de llama.