Diagnóstico complementario en odontología: microbiológico y molecular de Streptococcus Mutans

Abstract

Objetivo general: mplementar en el laboratorio de Investigaciones Científicas de la Facultad de Odontología de la UNNE, la utilización de diferentes técnicas de diagnóstico en infecciones orales. Objetivos específicos: -Desarrollar y aplicar técnicas de diagnóstico molecular, a fin de detectar microorganismos infecciosos, en especial Streptococos mutans, de la cavidad bucal.-Utilizar dichas técnicas para la identificación de cepas salvajes, provenientes de aislamientos primarios.-Difundir el Laboratorio de Investigación Científica de la UNNE, como centro de realización de técnicas diagnósticas complementarias. Métodos: Se procesará material genómico proveniente de aislamientos primarios que macro y microscópicamente correspondan a Streptococcus mutans. Se utilizará la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Descripta por Li Yihon en 2007.Para la extracción de ácido desoxirribonucleico (ADN), se empleará bromuro de cetiltrimetilamonio (CTAB), según protocolo de Stewart et al. 1993. Se utilizaran iniciadores específicos para el gen ARNr 16s de Streptococcus mutans utilizando como control positivo material genético extraído de la cepa ATCC 35668. Se procederá a la amplificación y posterior visualización en gel de agarosa por transiluminación. Resultados esperados: Este proyecto aportará nuevos conocimientos a la comunidad científica, permitirá realizar la identificación de cepas salvajes para el desarrollo de trabajos de investigación, surgirán resultados publicables, presentaciones a congresos y otros eventos científicos. Se prevé la formación de recursos humanos.

General objective: Promote the use of different diagnostic techniques in infections of the oral cavity. Specific objectives:- To implement molecular diagnostic techniques for the detection of infectious microorganisms of the oral cavity: Streptococcus mutans. - Apply the molecular techniques for the identification of wild strains from primary isolates. - Promote the dissemination of the Laboratory of Scientific Research of the Faculty of Dentistry of the UNNE for the realization of diagnostic techniques. Methods:The simple PCR technique described by Li Yihong 2007 will be used. Genomic material from primary isolates macro and microscopically corresponding to Streptococcus mutans will be processed. For the extraction of DNA, the protocol using cetyl trimethylammonium bromide (CTAB) will be used, amplification and subsequent visualization in agarose gel by transillumination. Spected results:This project will contribute new knowledge to the scientific community, will allow the identification of wild strains for the development of research works, publishable results will emerge, presentations to congresses and other scientific events. The training of human resources is foreseen.