Microscopia electrónica de barrido para el estudio de microbiomas en superficies del ámbito medico asistencial

Abstract

El objetivo de este trabajo fue caracterizar ultra-estructuralmente las comunidades microbianas presentes en el ámbito médico-asistencial. Se tomaron muestras de las superficies en distintos puntos por duplicado mediante cinta de papel y también se realizó el muestreo por hisopado y siembra en placas con medio de cultivo LB pH7 adicionado con antibióticos cicloheximida (CH) y ciclohehimida más ácido nalidixico (CH/NA). Los sitios de muestreo fueron: mesadas, aires acondicionados y equipamientos, de los Servicios de Biología Molecular, Producción y Distribución del Banco Central de Sangre ?Dr. César Guerra?, (PRIS-SI.PRO.SA). El análisis de las cintas aplicando Microscopía Electrónica de Barrido (MEB) permitió detectar biofilms en los diferentes sitios de muestreo. Los mismos presentaron una arquitectura tridimensional compleja caracterizada por microorganismos dispuestos en capas inmersas en abundante material extracelular. Los cultivos permitieron aislar 45 colonias que exhibieron diversos morfotipos (cocos, bacilos y cocobacilos) de mesadas, aires acondicionados y equipos. Mediante MEB fue posible analizar en detalle la estructura topográfica, organización y morfología de las bacterias aisladas. Se observó además, que algunas colonias establecían contactos estrechos. La técnica de MEB reveló un amplio espectro de relaciones entre ellas. Fue posible poner en evidencia cambios morfológicos en las bacterias como también la presencia de gran cantidad de material extracelular en los sitios de interacción. También, se identificaron diferencias en la conformación estructural de distintos sectores de algunas colonias. Este trabajo propone a las técnicas de microscopía de alta resolución como herramientas claves para el estudio in-situ de biofilms en superficies del ámbito médico-asistencial, debido a la estrecha relación que presentan con las enfermedades humanas.

El objetivo de este trabajo fue caracterizar ultra-estructuralmente las comunidades microbianas presentes en el ámbito médico-asistencial. Se tomaron muestras de las superficies en distintos puntos por duplicado mediante cinta de papel y también se realizó el muestreo por hisopado y siembra en placas con medio de cultivo LB pH7 adicionado con antibióticos cicloheximida (CH) y ciclohehimida más ácido nalidixico (CH/NA). Los sitios de muestreo fueron: mesadas, aires acondicionados y equipamientos, de los Servicios de Biología Molecular, Producción y Distribución del Banco Central de Sangre “Dr. César Guerra”, (PRIS-SI.PRO.SA). El análisis de las cintas aplicando Microscopía Electrónica de Barrido (MEB) permitió detectar biofilms en los diferentes sitios de muestreo. Los mismos presentaron una arquitectura tridimensional compleja caracterizada por microorganismos dispuestos en capas inmersas en abundante material extracelular. Los cultivos permitieron aislar 45 colonias que exhibieron diversos morfotipos (cocos, bacilos y cocobacilos) de mesadas, aires acondicionados y equipos. Mediante MEB fue posible analizar en detalle la estructura topográfica, organización y morfología de las bacterias aisladas. Se observó además, que algunas colonias establecían contactos estrechos. La técnica de MEB reveló un amplio espectro de relaciones entre ellas. Fue posible poner en evidencia cambios morfológicos en las bacterias como también la presencia de gran cantidad de material extracelular en los sitios de interacción. También, se identificaron diferencias en la conformación estructural de distintos sectores de algunas colonias. Este trabajo propone a las técnicas de microscopía de alta resolución como herramientas claves para el estudio in-situ de biofilms en superficies del ámbito médico-asistencial, debido a la estrecha relación que presentan con las enfermedades humanas.