Evidence of in utero infection by Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis using Multiple-Locus Variable-number tandem-repeat Analysis: first report in Argentina

Abstract

A pregnant heifer with an advanced clinical stage of paratuberculosis was reported in a herd in Argentina. Thus, the animal was euthanized and samples of organs of the cow and its fetus was taken and cultured for bacteriology in specific medium. Tissues were analyzed by histopathology (hematoxylin-eosin and Ziehl-Neelsen staining). Histopathological analysis of the cow’s samples revealed the presence of lesions consistent with paratuberculosis, and Ziehl-Neelsen staining revealed the presence of acid-fast bacilli, whereas the fetal tissues showed absence of lesions but the presence of acid-fast bacilli by Ziehl-Neelsen staining. After growing in specific medium, colonies in tissues from both cow and fetus were positive for IS900-PCR, confirming the presence of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP). Finally, the isolates were typed by Multiple-Locus Variable-number tandem-repeat Analysis (MLVA), which confirmed the epidemiological link between them. This study is the first in Argentina to report the detection of MAP that shares an identical MLVA type in a pregnant cow and its fetus. The results of this study are consistent with previous reports and highlight the intra-uterine transmission of MAP as an important source of infection within herds.

Uma novilha prenha em estado clínico avançado de paratuberculose foi observada em um rebanho bovino na Argentina. O animal foi eutanasiado e foram colhidas amostras dos seus órgãos e dos órgãos feto as quais foram cultivadas para bacteriologia em meio específico. Os tecidos foram examinados por histopatologia (coloração de hematoxilina-eosina e Ziehl-Neelsen). Na histopatologia das amostras colhidas da novilha foram observadas lesões compatíveis com paratuberculose e a coloração de Ziehl-Neelsen revelou a presença de bacilos álcool-ácido resistentes, nos tecidos fetais não foram observadas lesões, porém a coloração de Ziehl-Neelsen revelou a presença de bacilos álcool-ácido resistentes. Após o crescimento em meio específico, as colônias foram positivas para o teste IS900-PCR nos tecidos de ambos, vaca e feto, confirmando a presença de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis. Por fim, os isolados foram tipados por Multiple-Locus Variable-number tandem-repeat Analysis, confirmando a relação epidemiológica entre eles. Este estudo relata a primeira detecção de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis na Argentina em que houve o compartilhamento de um tipo idêntico de MLVA em uma vaca prenhe e no seu feto. Os resultados deste estudo são consistentes com relatos anteriores e destacam a transmissão intra-uterina de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis como importante fonte de infecção nos rebanhos de bovinos.