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dc.contributor.author
Morgenfeld, Mauro Miguel
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dc.contributor.author
Vater, Catalina Francisca
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dc.contributor.author
Alfano, Edgardo Federico
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dc.contributor.author
Boccardo, Noelia Ayelen
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dc.contributor.author
Bravo Almonacid, Fernando Felix
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dc.date.available
2021-08-30T18:13:02Z
dc.date.issued
2020-06
dc.identifier.citation
Morgenfeld, Mauro Miguel; Vater, Catalina Francisca; Alfano, Edgardo Federico; Boccardo, Noelia Ayelen; Bravo Almonacid, Fernando Felix; Translocation from the chloroplast stroma into the thylakoid lumen allows expression of recombinant epidermal growth factor in transplastomic tobacco plants; Springer; Transgenic Research; 29; 3; 6-2020; 295-305
dc.identifier.issn
0962-8819
dc.identifier.uri
http://hdl.handle.net/11336/139226
dc.description.abstract
Chloroplast transformation has many potential advantages for the production of recombinant proteins in plants. However, it has been reported that chloroplast expression of many proteins, such as human epidermal growth factor (hEGF), results hindered by post-transcriptional mechanisms. hEGF degradation has been related to the redox potential of the stroma and protein misfolding. To solve this problem, we proposed the redirection of hEGF into the thylakoid lumen where the environment could improve disulfide bonds formation stabilizing the functional conformation of the protein. We generated transplastomic tobacco plants targeting hEGF protein to the thylakoid lumen by adding a transit peptide (Str). Following this approach, we could detect thylakoid lumen-targeted hEGF by western blotting while stromal accumulation of hEGF remained undetectable. Southern blot analysis confirmed the integration of the transgene through homologous recombination into the plastome. Northern blot analysis showed similar levels of egf transcripts in the EGF and StrEGF lines. These results suggest that higher stability of the hEGF peptide in the thylakoid lumen is the primary cause of the increased accumulation of the recombinant protein observed in StrEGF lines. They also highlight the necessity of exploring different sub-organellar destinations to improve the accumulation levels of a specific recombinant protein in plastids.
dc.format
application/pdf
dc.language.iso
eng
dc.publisher
Springer
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dc.rights
info:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.uri
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
dc.subject
HUMAN EPIDERMAL GROWTH FACTOR, EGF
dc.subject
MOLECULAR FARMING
dc.subject
THYLAKOID
dc.subject
TRANSLOCATION
dc.subject
TRANSPLASTOMIC TOBACCO
dc.subject.classification
Bioquímica y Biología Molecular
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dc.subject.classification
Ciencias Biológicas
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dc.subject.classification
CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS
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dc.title
Translocation from the chloroplast stroma into the thylakoid lumen allows expression of recombinant epidermal growth factor in transplastomic tobacco plants
dc.type
info:eu-repo/semantics/article
dc.type
info:ar-repo/semantics/artículo
dc.type
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.date.updated
2021-08-27T20:19:28Z
dc.journal.volume
29
dc.journal.number
3
dc.journal.pagination
295-305
dc.journal.pais
Alemania
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dc.journal.ciudad
Cham
dc.description.fil
Fil: Morgenfeld, Mauro Miguel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; Argentina
dc.description.fil
Fil: Vater, Catalina Francisca. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; Argentina
dc.description.fil
Fil: Alfano, Edgardo Federico. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; Argentina
dc.description.fil
Fil: Boccardo, Noelia Ayelen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; Argentina
dc.description.fil
Fil: Bravo Almonacid, Fernando Felix. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; Argentina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología; Argentina
dc.journal.title
Transgenic Research
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dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/http://link.springer.com/10.1007/s11248-020-00199-7
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/doi/http://dx.doi.org/10.1007/s11248-020-00199-7
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