La actividad transcripcional de NF-kB es diferencialmente regulada por dominios específicos del coactivador TIF2

Abstract

Demostramos previamente que la sobreexpresión de coactivadores de receptores nucleares aumenta la actividad NF-κB en forma dosis dependiente. Se estudió el mecanismo por el cual el coactivador TIF2 regula la actividad de NF-κB. Determinamos que: 1) el inhibidor específico de p38 disminuye al 50% la actividad transcripcional de NF-κB, aún en células que sobreexpresan distintas deleciones de TIF2; 2) existe interacción física directa de TIF2 con p38; y RelA determinada a través de ensayos de unión con proteína traducida in vitro; 3) TIF2 es sustrato de p38; 4) mediante ensayos de unión con extractos proteicos de células HEK 293 estimuladas o no con TNF-α 20 ng/ml existe interacción física de TIF2 con IKK, e IκBα sólo en condiciones basales. Este complejo que contiene a NF-κB regula su actividad y la expresión de genes blanco de este factor de transcripción en un contexto fisiológico determinado dependiendo del contenido del complejo coactivador.

We have previously shown that nuclear receptor coactivator overexpression significantly enhanced NF-kappaB activity in a dose response manner. We studied the mechanism by which TIF2 regulates NF-kappaB activity. We determined that: 1) the p38 specific inhibitor reduces 50% NF-kappaB transcriptional activity, even in cells that overexpress distinct TIF2 deletions; 2) there is a physical interaction between TIF2 and p38 and RelA determined through in vitro translated protein binding assays; 3) TIF2 is a p38 substrate; 4) there is a physical interaction between TIF2 and IKK in TNF-alpha 20 ng/ml stimulated or not HEK 293 cell protein extract, and IkappaB only in basal conditions, determined by binding pull down assays. This NF-kappaB complex regulates its activity and targets gene expression in a determined physiologic context depending on the coactivator complex content.