Acción biológica de derivados sintéticos del alcaloide indólico tetrahidro-β-carbolina sobre tripanosomátidos

Abstract

La enfermedad de Chagas y la leishmaniasis son un importanteproblema de salud pública en nuestro país, principalmenteen el norte, donde las áreas endémicas se solapan.La eficacia de los tratamientos es variable, dependiendo dela especie infectante y la etapa de infección, además de presentarefectos adversos y aumentar la resistencia parasitaria.Previamente, hemos demostrado la actividad de derivadosde tetrahidro-β-carbolinas (βC), alcaloides de tipo indólicocon un núcleo tricíclico común, frente a distintos estadíosparasitarios de Trypanosoma cruzi y Leishmania spp. El objetivode este trabajo fue estudiar los posibles mecanismosde acción de estos compuestos. Luego de la incubación deepimastigotes y promastigotes (1x106/ml) con la concentracióninhibitoria 90 (CI90) de las βC, se realizaron los siguientesensayos: tinción con naranja de acridina y observaciónpor microscopía de fluorescencia para detectar cambiosmorfológicos y fisiológicos; tinción con JC-1(específico mitocondrias)para observar por fluorescencia posibles cambiosen el potencial de membrana mitocondrial; incubación conel reactivo CellTiter-Glo® para detectar por luminiscenciacambios en el contenido de ATP; tinción con colorantefluorescente SITOX® Green para observar cambios en lapermeabilidad de la membrana celular; incubación con lasonda fluorescente CellRox® y observación por microscopíaconfocal para estudiar la aparición y concentración de especiesreactivas del O2 (ROS) en los parásitos; tinción con Anexina-V/ioduro de propidio para observar translocación defosfatidilserina en la membrana celular; tinción con Höechst33342/ioduro de propidio para observar por microscopía defluorescencia condensación de la cromatina parasitaria. Luegodel tratamiento de los parásitos con las βC de detectótranslocación de fosfatidilserina en la membrana plasmática,condensación de la cromatina, alteración del potencial demembrana mitocondrial, disminución del contenido de ATPy daño oxidativo por acumulación de ROS. No se observaronalteraciones en la permeabilidad de la membrana plasmática.Las βC ensayadas inducen múltiples alteraciones queconducirían a la muerte celular programada de los parásitosprobablemente por mecanismos de tipo apoptótico y autofagia.