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dc.contributor.author
Rojas, Bruno Ezequiel
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dc.contributor.author
Hartman, Matias Daniel
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dc.contributor.author
Figueroa, Carlos Maria
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dc.contributor.author
Leaden, Laura
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dc.contributor.author
Podesta, Florencio Esteban
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dc.contributor.author
Iglesias, Alberto Alvaro
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dc.date.available
2020-11-23T13:07:31Z
dc.date.issued
2019-10
dc.identifier.citation
Rojas, Bruno Ezequiel; Hartman, Matias Daniel; Figueroa, Carlos Maria; Leaden, Laura; Podesta, Florencio Esteban; et al.; Biochemical characterization of phosphoenolpyruvate carboxykinases from Arabidopsis thaliana; Portland Press; Biochemical Journal; 476; 20; 10-2019; 2939-2952
dc.identifier.issn
0264-6021
dc.identifier.uri
http://hdl.handle.net/11336/118773
dc.description.abstract
ATP-dependent phosphoenolpyruvate carboxykinases (PEPCKs, EC 4.1.1.49) from C4 and CAM plants have been widely studied due to their crucial role in photosynthetic CO2 fixation. However, our knowledge on the structural, kinetic and regulatory properties of the enzymes from C3 species is still limited. In this work, we report the recombinant production and biochemical characterization of two PEPCKs identified in Arabidopsis thaliana: AthPEPCK1 and AthPEPCK2. We found that both enzymes exhibited high affinity for oxaloacetate and ATP, reinforcing their role as decarboxylases. We employed a high-throughput screening for putative allosteric regulators using differential scanning fluorometry and confirmed their effect on enzyme activity by performing enzyme kinetics. AthPEPCK1 and AthPEPCK2 are allosterically modulated by key intermediates of plant metabolism, namely succinate, fumarate, citrate and α-ketoglutarate. Interestingly, malate activated and glucose 6-phosphate inhibited AthPEPCK1 but had no effect on AthPEPCK2. Overall, our results demonstrate that the enzymes involved in the critical metabolic node constituted by phosphoenolpyruvate are targets of fine allosteric regulation.
dc.format
application/pdf
dc.language.iso
eng
dc.publisher
Portland Press
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dc.rights
info:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.uri
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
dc.subject
PEP METABOLISM
dc.subject
C3 PLANTS
dc.subject
ENZYME REGULATION
dc.subject
CARBOXYKINASE
dc.subject.classification
Bioquímica y Biología Molecular
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dc.subject.classification
Ciencias Biológicas
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dc.subject.classification
CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS
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dc.title
Biochemical characterization of phosphoenolpyruvate carboxykinases from Arabidopsis thaliana
dc.type
info:eu-repo/semantics/article
dc.type
info:ar-repo/semantics/artículo
dc.type
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.date.updated
2020-11-20T19:56:14Z
dc.journal.volume
476
dc.journal.number
20
dc.journal.pagination
2939-2952
dc.journal.pais
Reino Unido
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dc.journal.ciudad
Londres
dc.description.fil
Fil: Rojas, Bruno Ezequiel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Agrobiotecnología del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Instituto de Agrobiotecnología del Litoral; Argentina
dc.description.fil
Fil: Hartman, Matias Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Agrobiotecnología del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Instituto de Agrobiotecnología del Litoral; Argentina
dc.description.fil
Fil: Figueroa, Carlos Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Agrobiotecnología del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Instituto de Agrobiotecnología del Litoral; Argentina
dc.description.fil
Fil: Leaden, Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Centro de Estudios Fotosintéticos y Bioquímicos. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Centro de Estudios Fotosintéticos y Bioquímicos; Argentina
dc.description.fil
Fil: Podesta, Florencio Esteban. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Centro de Estudios Fotosintéticos y Bioquímicos. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Centro de Estudios Fotosintéticos y Bioquímicos; Argentina
dc.description.fil
Fil: Iglesias, Alberto Alvaro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Agrobiotecnología del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Instituto de Agrobiotecnología del Litoral; Argentina
dc.journal.title
Biochemical Journal
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dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://portlandpress.com/biochemj/article/476/20/2939/220459/Biochemical-characterization-of
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/doi/http://dx.doi.org/10.1042/BCJ20190523
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