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dc.contributor.author
Ginart, Santiago
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dc.contributor.author
Alechine, Evguenia
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dc.contributor.author
Caputo, Mariela
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dc.contributor.author
Cano, H.
dc.contributor.author
Corach, Daniel
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dc.contributor.author
Sala, Adriana Andrea
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dc.date.available
2020-11-05T16:39:26Z
dc.date.issued
2015-12
dc.identifier.citation
Ginart, Santiago; Alechine, Evguenia; Caputo, Mariela; Cano, H.; Corach, Daniel; et al.; Development and validation of a human DNA quantification and sex determination approach based on real time PCR followed by high resolution melting analysis; Elsevier Ireland Ltd; Forensic Science International: Genetics; 5; 12-2015; 269-271
dc.identifier.issn
1875-175X
dc.identifier.uri
http://hdl.handle.net/11336/117688
dc.description.abstract
DNA quantitation is one of the most crucial factors affecting the success and quality of DNA typing by PCR. The aim of this work was to develop a DNA quantification assay to be used in routine forensic casework. It should be able to discriminate, simultaneously, the presence of male and female DNA by means of multiplex real time PCR, followed by high resolution melting analysis (HRM), including a fluorescent intercalating dye Syto 9. The approach is co-amplified fragments of a gene common to both genders, Amelogenin-Amel and a specific sequence of the human Y chromosome (HSYCS) whose melting temperature differs from Amel in 5.3–5.5 °C. Hence, it allows discriminating two peaks after HRM analysis if only male DNA is present in the sample or a single peak if only female template is present. The short length of both amplicons, 106/112 bp for Amel and 84 bp for HSYCS, facilitates quantitation and gender detection in degraded samples that characterize evidentiary material. We achieved the quantification of male, female and experimentally mixed samples with very low DNA quantities (20 pg/μl). We propose an alternative approach to commercial DNA quantitation kits. Our development showed to be fast, highly sensitive, laborsaving and cost-effective.
dc.format
application/pdf
dc.language.iso
eng
dc.publisher
Elsevier Ireland Ltd
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dc.rights
info:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.uri
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/2.5/ar/
dc.subject
HUMAN DNA QUANTITATION
dc.subject
INTERCALATING DYE
dc.subject
REAL TIME PCR
dc.subject
SEX DETERMINATION
dc.subject.classification
Bioquímica y Biología Molecular
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dc.subject.classification
Ciencias Biológicas
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dc.subject.classification
CIENCIAS NATURALES Y EXACTAS
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dc.title
Development and validation of a human DNA quantification and sex determination approach based on real time PCR followed by high resolution melting analysis
dc.type
info:eu-repo/semantics/article
dc.type
info:ar-repo/semantics/artículo
dc.type
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.date.updated
2020-09-08T14:00:48Z
dc.journal.volume
5
dc.journal.pagination
269-271
dc.journal.pais
Países Bajos
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dc.journal.ciudad
Amsterdam
dc.description.fil
Fil: Ginart, Santiago. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Servicio de Huellas Digitales Genéticas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentina
dc.description.fil
Fil: Alechine, Evguenia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Servicio de Huellas Digitales Genéticas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentina
dc.description.fil
Fil: Caputo, Mariela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Servicio de Huellas Digitales Genéticas; Argentina
dc.description.fil
Fil: Cano, H.. Laboratorio Regional de Investigación Forense; Argentina
dc.description.fil
Fil: Corach, Daniel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Servicio de Huellas Digitales Genéticas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentina
dc.description.fil
Fil: Sala, Adriana Andrea. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Servicio de Huellas Digitales Genéticas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentina
dc.journal.title
Forensic Science International: Genetics
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dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/url/https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S1875176815301992
dc.relation.alternativeid
info:eu-repo/semantics/altIdentifier/doi/https://doi.org/10.1016/j.fsigss.2015.09.107
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