Non-polar extracts of Nicotiana glauca (Solanaceae) induce apoptosis in human rhabdomyosarcoma cells

Abstract

Rhabdomyosarcoma (RMS) is the most common soft-tissue tumour in children andadolescents. It originates in normal skeletal muscle from myogenic cells that have failed tofully differentiate, and it usually has a poor prognosis. Current RMS therapy has manyadverse effects. Hence, new treatments are needed. Various pharmacological properties,such as analgesic, antineoplastic, antimicrobial, and antiparasitic properties, have beendemonstrated in species of the Solanaceae family. We performed ethanolic extraction fromleaves of Nicotiana glauca (Solanaceae), and the extract was successively partitioned withn-hexane, chloroform, and ethyl acetate. We evaluated the effects of extracts on RMScells, and we found that the extracts trigger apoptosis. By bio-guided fractionation assays,we identified the apoptotic agents. Morphological assessment after apoptotic cell inductionof cultured cells, mitochondrial and nuclear morphology by Mitotracker, and 4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) staining, respectively, were analysed in fluorescentmicroscopy. The capacity of the cells to migrate or proliferate was analysed by the Petitassay, followed by methylene blue staining. NMR and GC-MS spectrometry were used toidentify palmitic acid and scopoletin as the phytochemicals responsible for the observedeffects. These results indicate that these compounds are apoptotic inducers and they couldbe useful as chemotherapeutic agents against muscle tumours.

Rabdomiossarcoma (RMS) é o tumor de tecidos moles mais comum em crianças e adolescentes. Ele se origina no músculo esquelético normal a partir de las células miogênicas que no conseguiram-se diferenciar completamente e pelo general tem um prognóstico ruim. A terapia atual com RMS tem muitos efeitos adversos e portanto, novos tratamentos são necessários. Várias propriedades farmacológicas, como propriedades analgésica, antineoplásica, antimicrobiana e antiparasitária, foram demostradas em espécies da família Solanaceae. Neste trabalho, foi realizada a extração etanólica das folhas de Nicotiana glauca (Solanaceae), eo extrato foi particionado sucessivamente com n-hexano, clorofórmio y acetato de etila. Avaliamos os efeitos dos extratos nas células RMS e descobrimos que os extratos desencadeiam apoptose. Pelos ensaios de fracionamento bio-guiado, identificamos os agentes apoptóticos. Avaliação morfológica após indução da apoptose das células cultivadas ea morfologia mitocondrial e nuclear por coloração com Mitotracker e 4,6-diamidino-2-fenilindol (DAPI), respectivamente, foram analisadas com microscopia fluorescente. A capacidade das células para migrar ou proliferar foi analisada hair ensaio Petit, seguido pelacoloração com azul de metileno. Una espectrometría de RMN y GC-MS para uso utilizado para una identificación de ácido palmítico y una escopoletina como fitoquímicos responsáveis ​​pelos efeitos observados.