Caracterización de la proteína microtubular de diferentes helmintos parásitos: Sus implicancias en el modo de acción de los benzimidazoles antihelmínticos

Abstract

Los antihelmínticos benzimidazoles (BZD) desestabilizan el equilibrio tubulina-microtúbulo originando en el parásito una pérdida de la homeostasis celular, desprendimiento y muerte. Su baja toxicidad se explica por una mayor afinidad por la tubulina del parásito, especialmente en cestodes y nematodes, comparada con la observada para tubulina de mamífero. Al ser tubulina una proteína altamente conservada en la escala zoológica se hace necesario investigar las probables causas de esa diferente afinidad. El objetivo del presente trabajo fue comparar ciertas características moleculares de tubulina de trematodes (Fasciola hepatica), cestodes (Moniezia expansa), nematodes (Ascaris suum) y tubulina purificada de cerebro de rata. Se utilizaron técnicas electroforéticas (PAGE) e inmunoquímicas con anticuerpos monoclonales específicos dirigidos contra a y b tubulina. Los resultados demostraron que aunque en diferente cuantía mientras que fue factible la detección de las diferentes tubulinas en mamíferos, cestodes y nematodes, en ninguno de los casos se detectó la tubulina de F. hepatica. Esto tiene implicancias directas en el entendimiento de las diferentes susceptibilidades de cada especie a estos fármacos, lo cual puede ser un primer paso hacia la comprensión de la actividad farmacológica de estas drogas.

The anthelmintic benzimidazoles cause a destabilization of tubulin-microtubule equilibrium which induces to a lost of the cellular homeostasis, detaching and death of the parasite. They have a low toxicity on the infested animal, explained as a higher affinity for the parasite tubulin, mainly that of cestodes and nematodes. From an evolutionary point of view, tubulin is a highly conserved protein, thus in order to understand the probable causes for that difference in affinity, it is necessary to further investigate the microtubular protein at a molecular level. The aim of this project was to compare certain molecular characteristics of tubulin from trematodes (Fasciola hepatica), cestodes (Moniezia expansa), nematodes (Ascaris suum) and purified rat brain tubulin. For this purpose electrophoretic techniques (PAGE) followed by immunochemistry using specific monoclonal antibodies against α and β tubulin were used. Results showed that it was possible to detect tubulin spots, but not in the same amount, in mammals, cestodes and nematodes. Under our experimental conditions it was not possible to detect F. hepatica tubulin. This could help to understand the differences in the answer to the anthelmintic drugs and also to learn something about to the farmacological activity of these.