Diseño de un Reactivo de Inmunoaglutinación para Diagnosticar la Enfermedad de Chagas utilizando Partículas de Látex Funcionarizadas

Abstract

La enfermedad de Chagas es reconocida como la principal endemia de América Latina. Aunque el parásito, Trypanosoma cruzi, fue descubierto en 1909, la importancia de la enfermedad y su dimensión como problema social fue comprobada recién a mediados del siglo XX, momento a partir del cual comenzó una serie de acciones destinadas a combatirla. Para lograr este objetivo, es fundamental el diagnóstico de la enfermedad y el presente trabajo avanza en ese sentido a través del desarrollo de un reactivo de inmunoaglutinación. Con este propósito, se sintetizaron primero partículas de látex con funcionalidades carboxilo y acetal, que sirvieron de soporte para ligar diferentes proteínas antigénicas del T. cruzi (homogenato del parásito y proteínas recombinantes simples y quiméricas), produciendo complejos látex-proteína capa-ces de actuar como reactivos de inmunoaglutinación para detectar la enfermedad de Chagas. Se buscaron luego las condiciones “óptimas” de reacción, y se evaluó y comparó el rendimiento de las distintas proteínas frente a un panel de sueros. La reacción antígeno-anticuerpo se detectó midiendo los incrementos en la absorbancia óptica respecto de un blanco (complejo látex-proteína sin el agregado de suero). Las proteínas recombinantes dieron lugar a mejores resultados que el homogenato, especialmente cuando se empleó una proteína quimérica. El trabajo realizado permitió desarrollar un “kit de inmunoaglutinación” para detectar en forma sencilla, precoz, e in situ, la enfermedad de Chagas.

Chagas disease is recognized as the leading Latin American endemic illness. Although the parasite, Trypanosoma cruzi, was discovered in 1909, the importance of the disease and its dimension as a social problem was not proved until the mid-twentieth century, when a series of actions began to combat the Chagas. To this effect, it is essential to diagnose the disease and the present work pretends to advance in such sense, through the development of an immunoagglutination test. Latex particles with carboxyl and acetal functionalities were synthesized, and employed as a support of different antigenic proteins of T. cruzi (homogenate of the parasite, and single and chimeric recombinant proteins), for producing latex-protein complexes able to be used as immunoaggluti-nation reagents for detecting Chagas disease. Optimal reaction conditions were sought and the per-formance of various proteins was evaluated against a panel of sera. The antigen-antibody reaction was detected by measuring the optical absorbance incre-ments with respect to a blank (a latex-protein complex without serum). Recombinant proteins allowed out-perform the homogenate, especially when chimeric proteins were employed. The present work allowed the development of an "immunoagglutination kit" to easily, early, and in situ detect Chagas disease.